组蛋白H3K9me甲基化修饰失衡在儿童喘息性疾病中的作用

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目的:探讨组蛋白H3K9me甲基化修饰失衡在儿童喘息性疾病中的作用,为临床防治儿童喘息性疾病提供新的理论依据。方法:收集2018年11月-2020年6月在遵义医科大学附属医院儿科住院有纤维支气管镜指针的重症肺炎伴喘息、重症肺炎伴喘息(恢复期)、重症肺炎不伴喘息、支气管异物、先天性喉软骨发育不良、气道畸形患儿(共239例)的支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF),分为对照组,喘息组(急性期组),非喘息组,喘息恢复期组。进行如下检测:微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测BALF中细胞因子干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)水平;免疫印迹法(Western blot,WB)检测BALF中组蛋白H3K9me2、H3K9me3的甲基化水平;免疫荧光检测BALF中巨噬细胞组蛋白H3K9me2甲基化水平及组蛋白甲基化酶G9α的表达水平。结果:(1)CBA结果显示,喘息组患儿BALF中IL-1、IL-6表达水平较非喘息组和对照组显著升高(P﹤0.05),IL-10的表达水平喘息组较非喘息组和对照组显著降低(P﹤0.05),而IFN-γ的表达水平在各组患儿之间无显著变化(P>0.05)。(2)WB结果显示,与非喘息组和对照组比较,喘息组组蛋白H3K9me2、H3K9me3甲基化水平显著升高(P﹤0.01)。(3)免疫荧光染色结果显示,与非喘息组和对照组比较,喘息组组蛋白H3K9me2甲基化水平和组蛋白甲基化酶G9α的表达水平均显著升高(P﹤0.05),而非喘息组与对照组比较,H3K9me2甲基化水平和组蛋白甲基化酶G9α的表达水平无显著变化(P>0.05)。(4)WB结果显示,与重症肺炎伴有喘息(急性期)比较,重症肺炎伴有喘息(恢复期)H3K9me2、H3K9me3甲基化水平均显著降低(P﹤0.05)。结论:(1)BALF中细胞因子IL-1、IL-6和IL-10表达异常可能参与了儿童喘息性疾病的发病过程。(2)组蛋白H3K9me2、H3K9me3甲基化修饰失衡可能参与了儿童喘息性疾病的发生、发展。
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