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实验证明南方鲶出血性败血症是由细菌引起的。从自然患病南方鲶的肝、肾、脾等脏器分离获得3株强致病性菌株,鉴定均为嗜水气单胞菌,但3株菌药物敏感性有差异。 患病南方鲶外周血液中红细胞和嗜中性粒细胞有较大变形,淋巴细胞个体增大。红细胞显著减少,不成熟红细胞增多。白细胞总数显著增加,白细胞分类百分比(DLC)发生变化,嗜中性粒细胞、单核细胞分类百分比明显增加,淋巴细胞和血栓细胞变化不显著。另外,红细胞脆性增加,血细胞沉降率增加。 病鱼肝实质结构严重受损,细胞索结构模糊,界限不清;肝细胞肿大,细胞核肿胀,空泡化,肝细胞大面积坏死解体,染成浅色一片。肾单位数量显著减少,肾间质所占比例增大,淋巴细胞增多;肾小囊腔扩大;肾小管肿胀,部分肾小管上皮细胞变性,甚至坏死。脾脏淋巴组织松散,淋巴细胞减少,衰老细胞增多。 嗜水气单胞菌灭活全菌苗免疫南方鲶,免疫后第2d免疫组实验鱼外周血白细胞数量剧增,白细胞分类百分比发生变化。单核细胞和嗜中性粒细胞分类百分比在第2~14d显著增加,以后逐渐减低,至第28d恢复到起始状态,其中在第7d均达到最大值。单核细胞的增殖幅度明显高于嗜中性粒细胞。淋巴细胞在第2~4d比对照组低,从第7d起开始增殖,第21d达到最大值47.29%;实验过程中免疫组血栓细胞分类百分比始终略低于对照组。吞噬细胞活性显著增强,吞噬百分比平均比对照组提高了17.66%,吞噬指数平均比对照组高出1.16。免疫后第4d吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)均达到最高值,前者为48.40%,后者为4.82,第21d的吞噬百分比和吞噬指数开始下降,但仍高于对照组。 嗜水气单胞菌灭活全菌苗、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、胞外产物(ECP)、菌细胞苗分别进行1次免疫和加强免疫南方鲶,各种疫苗在接种后第14d血清凝集抗体效价开始上升,第21d快速上升,至第28d达到峰值,后缓慢下降,但能以较高水平维持20d左右,之后快速下降。同种疫苗的加强免疫组均比1次免疫组获得的凝集抗体效价高,高效价抗体持续的时间长,全菌苗、LPS、ECP和菌细胞加强免疫组凝集抗体滴度的峰值分理学硕l学位论文:南方鳍出l(ll.性败](ll庄的炳原、病理及免疫颅防研究别为1024、256、512和128,1次免疫的峰值依次为128、64、128和32。LPS组凝集抗体滴度峰值出现较ECP组早,但ECP组的凝集抗体滴度更为稳定,能以较高水平持续到第8周。 全菌苗、脂多糖(LPS)和胞外产物(ECP)均能使鱼体获得较好的保护效果,菌细胞苗效果差。免疫后不同时间各疫苗对同源菌株注射攻击的保护效果不同,第2周时,各组的保护力均很低;第4周,各疫苗组的免疫保护率达到最高,分别如下:全菌苗一次免疫组保护率为50%,加强免疫组64.3%;LPS一次免疫为42.9%,加强免疫组为50%;ECP一次免疫64.3%,加强免疫为78.6%;第6周时,各组的保护率略低于第4周,但仍保持了较好的保护效果。各对照组死亡率均高于93.3%,且对照组死亡鱼表现出头部、眼睛、上下领充血等出血病典型症状。说明接种鱼获得了良好的免疫保护效果,能有效抵抗嗜水气单胞菌的攻击。