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长期使用抗生素导致了诸多问题,许多国家早已限制在饲料添加剂中抗生素的使用。在此背景下,无毒副作用的益生菌得到了广泛关注。乳酸片球菌是具有益生效果的肠道益生菌,利用乳酸片球菌代替抗生素对畜牧业的可持续发展具有重要意义。但是益生菌的活性会受外界环境的温度、湿度、pH值等的影响,当处于不利条件下时会大量死亡,导致其不能充分发挥对宿主产生的有益作用。本研究对乳酸片球菌的体外益生特性、发酵工艺及喷雾干燥工艺进行了研究。具体研究结果如下:对实验室保藏的菌种进行菌落形态和16S rRNA基因保守序列分析,鉴定该菌株为乳酸片球菌,将其命名为乳酸片球菌S204(Pediococcus acidilactici S204)。从P.acidilactici S204的抑菌能力及其对高温、模拟胃液、猪胆盐、抗生素耐受性等方面研究其益生特性。结果表明该菌株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长均有抑制作用;55℃处理20 min时活菌数数量级没有变化;60℃处理10 min时活菌数下降约3个数量级,20 min时活菌数降至0。耐受pH2.5的模拟胃液达1 h时存活率66.17%,2 h时存活率17.95%;对0.1%-0.5%的猪胆盐表现出良好的耐受性;对青霉素敏感,对氨苄西林、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、万古霉素有耐药性。采用单因素实验对乳酸片球菌S204的发酵工艺进行优化。得到的培养基组分为葡萄糖6%,酵母浸粉6%,MnSO4·H2O 0.02%,MgSO4·7H2O 0.04%,无水乙酸钠0.5%,柠檬酸铵0.2%,K2HPO4 0.2%,吐温-80 0.1%。发酵条件:培养基初始pH6.5,接种量5%,37℃下静置培养。该菌株在此培养基及培养条件下培养15 h时活菌数可达到7.9×109cfu/mL。用5 L发酵罐进行放大实验,装液量1.5 L,葡萄糖6%,酵母浸粉6%。发酵过程通过流加碱液调控pH为6.5,并补加70 g的葡萄糖和70 g的酵母浸粉,发酵15 h时活菌数可达2.72×10100 cfu/mL。采用单因素实验对乳酸片球菌S204的喷雾干燥工艺进行优化。得到复配壁材组成为脱脂奶粉12%,乳糖2%。在进风温度160℃,出风温度63-68℃条件下,微胶囊中乳酸片球菌活菌数3.83×109 cfu/g,存活率67.06%。