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目的:1、通过牛血清白蛋白培养基(BSA)检测白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)的活性差异。2、通过动物(小鼠)实验比较白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株的毒力及致病性差异。3、通过实时定量PCR(RT-PCR)比较白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组SAP2、CDR1、CDR2及MDR1 m RNA表达水平的差异。方法:1、收集临床上可疑的真菌标本,分离、培养、鉴定出白念珠菌伊曲康唑耐药菌株与敏感菌株。用BSA培养基检测白念珠菌伊曲康唑耐药株和敏感株Sap活性差异,并作统计学分析。2、将小鼠随机分为3个组(耐药组、敏感组和空白对照组),取白念珠菌伊曲康唑耐药菌株和敏感菌株的菌悬液(或无菌生理盐水)分别注入小鼠的尾静脉,观察1个月(30天),统计小鼠的生存情况及存活天数,计算小鼠的死亡率和生存率。3、RT-PCR检测白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组菌株的SAP2、CDR1、CDR2以及MDR1 m RNA的表达水平,并作统计学分析。结果:1、共检出白念珠菌菌株40株,白念珠菌伊曲康唑耐药株20株,敏感株20株。所有检测的白念珠菌伊曲康唑耐药株(20株)和敏感株(20株)均有透明环产生,白念珠菌伊曲康唑耐药组Pz值=0.611±0.015,敏感组Pz值=0.667±0.015,两组菌株Sap活性差异具有统计学意义(t=11.935,P<0.001),即耐药组Sap活性明显高于敏感组。2、白念珠菌伊曲康唑耐药组小鼠1个月内死亡16只,死亡率是80%;敏感组小鼠死亡7只,死亡率是35%;两组小鼠的死亡率差异有统计学意义(2c=8.286,P=0.004),即耐药组菌株对小鼠的致病性及毒力明显高于敏感组。3、RT-PCR分析白念珠菌伊曲康唑耐药组和敏感组SAP2、CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表达量,耐药组SAP2基因m RNA(2.015±0.304)表达水平高于敏感组(0.732±0.215),差异有统计学意义(t=15.425,P<0.001)。耐药组CDR1、CDR2及MDR1的m RNA表达与敏感组相比,差异无统计学意义;SAP2和MDR1基因在转录水平有明显正相关(r=0.696,P<0.001),CDR1和CDR2在转录水平有明显正相关(r=0.837,P<0.001)。结论:1、白念珠菌伊曲康唑耐药组Sap活性高于敏感组。2、白念珠菌伊曲康唑耐药组的毒力及对小鼠的致病性高于敏感组。3、白念珠菌伊曲康唑耐药组SAP2基因m RNA表达水平高于敏感组;SAP2和MDR1基因可能受同一调控机制调节;CDR1和CDR2基因可能受同一调控机制调节。白念珠菌Sap与耐药有一定关系。