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反式脂肪酸(trans fatty acid,TFA)是含有反式非共轭不饱和双键的脂肪酸,既产生于油脂加工过程中,也存在于反刍动物脂肪中。研究表明,长期摄入加工产生的TFA可能引发肥胖,而且发育早期TFA的摄入与成年后肥胖发生率呈正相关。目前,反刍动物来源的TFA对肥胖的影响尚未见报道。肥胖是脂肪细胞数目增多和体积增大的结果,因此,脂肪干细胞的成脂分化对脂肪组织形成至关重要。但目前TFA对脂肪干细胞分化的作用及机制尚未阐明。因此本论文研究了油脂加工中产生的一种主要反式脂肪酸异构体反9-十八碳烯酸(反油酸)和反刍动物来源的一种主要反式脂肪酸异构体反11-十八碳烯酸(反异油酸)对脂肪干细胞成脂分化的影响,并对其作用机制进行了初步探讨。通过体外培养C57/BL6J小鼠脂肪干细胞,进行多项分化潜能分析和细胞表面抗原标志鉴定,建立成脂诱导分化模型。应用油红O染色实验和胞内甘油三酯含量测定实验,以油酸为对照,分析反油酸和反异油酸对脂肪干细胞成脂分化的影响,结果发现,在20-60μmol/L浓度范围内,反油酸和反异油酸能够显著促进脂肪干细胞的成脂分化,其作用呈现剂量效应关系,且反油酸促进成脂分化的作用显著强于反异油酸。进一步应用蛋白免疫印迹实验和细胞免疫荧光分析,发现反油酸和反异油酸能够明显下调β-catenin蛋白的表达,提示反油酸和反异油酸促进脂肪干细胞成脂分化作用可能与Wnt/β-catenin信号转导通路有关。应用β-catenin激活剂Li Cl,结合油红O染色实验和胞内甘油三酯含量测定分析,发现Li Cl能够显著拮抗反油酸和反异油酸对脂肪干细胞的成脂分化作用;此外,应用β-catenin激活剂Li Cl,结合蛋白免疫印迹实验,检测到Li Cl能够明显拮抗反油酸和反异油酸对细胞β-catenin蛋白表达的下调作用。进一步通过细胞免疫荧光分析,发现Li Cl能够明显拮抗反油酸和反异油酸对胞浆和胞核中β-catenin蛋白表达的抑制作用,提示反油酸和反异油酸可能通过调节β-catenin的蛋白表达影响脂肪干细胞成脂分化。综上,本研究发现反油酸和反异油酸能够促进脂肪干细胞成脂分化,且反油酸促成脂分化的作用显著强于反异油酸。反油酸和反异油酸可能通过下调β-catenin蛋白表达,进而影响Wnt/β-catenin信号转导通路的活化状态而发挥其促进成脂分化的作用。