研究背景:膀胱癌是一种发生于尿路上皮的异质性病变,是男性泌尿系统最常见的恶性疾患之一,男性与女性的比例大约是34:1。据权威数据统计,2020年全世界约有573000新发病例,死亡人数213000例,居世界常见肿瘤的第十位,男性常见肿瘤第六位。发展中国家的膀胱癌发病率是发达国家的2倍,我国每年新发膀胱癌患者超80000人,男性患者约占75%,年增长率约为4.1%。根据肿瘤浸润深度不同,患者预后也存在明显差异。膀胱癌严重影响人类健康,但其诊治进展较为缓慢,而肿瘤转移是导致患者死亡的首要原因,该过程涉及多种基因表达异常,共同参与调控肿瘤细胞增殖与转移,明确肿瘤转移机理可为膀胱癌转移防治提供理论基础。近年来随着高通量基因组测序及基因芯片技术的发展,各大肿瘤公共数据库存储了海量数据,为肿瘤研究的数据挖掘和课题前期分析提供了丰富的资源。我们前期利用TCGA数据库,筛选出SPNS1（鞘氨醇-1-磷酸转运体1）,其在膀胱肿瘤中过表达,且高表达患者总体预后较差。既往文献暂未报道SPNS1调控膀胱癌的具体机制,拟通过体外实验初步探究SPNS1对膀胱肿瘤的影响。目的:本研究旨在:1.明确SPNS1在膀胱癌与癌旁组织表达差异;2.采用RNAi干扰方法,下调SPNS1表达,并进一步研究其对膀胱肿瘤细胞的生物学影响。方法:1.通过挖掘TCGA数据库中膀胱癌患者癌与癌旁组织RNA-seq原始表达数据,并使用R语言软件结合edgeR包进行预后及表达差异的基因筛选（通过单因素、多因素回归分析,并结合基因高低表达与不同预后,按表达量高低排序）,选取前100个显著上调的基因。2.采用脂质体法瞬时转染siRNA入膀胱癌细胞,共分为阴性对照组、实验组（siRNA13）,通过qPCR及western blot检测SPNS1表达,并通过平板克隆实验、伤口愈合实验及transwell迁移实验检测其对肿瘤细胞增殖、迁移能力的影响。3.提取不同处理细胞的RNA及蛋白,将提取的RNA进行下游测序,筛选实验组及对照组明显差异表达的下游基因;并通过western blot检测实验组及对照组EMT相关蛋白的表达。结果:1.相较于癌旁组织,SPNS1在膀胱癌中表达明显上调;且高表达SPNS1患者总体预后较差;2.相比于阴性对照组,实验组SPNSlmRNA及蛋白水平明显下降,肿瘤细胞迁移能力被明显抑制,并初步发现增殖能力亦受明显影响;3.下游基因检测显示:相较于阴性对照组,实验组BCL2A1 mRNA明显下降,而western blot结果显示EMT marker及相关通路未提示明显差异,进一步检测发现C-MYC蛋白在实验组中表达明显下降。结论:SPNS1在膀胱癌中呈高表达,通过siRNA转染细胞可明显下调SPNS1表达并可抑制肿瘤细胞增殖、迁移能力,其机制可能通过SPNS1/BCL2A1/C-MYC途径实现。