传染性喉气管炎（Infectious Laryngotracheitis，ILT）是鸡的一种病毒性呼吸道传染病，可引起鸡死亡或者产蛋下降而造成生产的严重损失。对传染性喉气管炎病毒（ILTV）的gＢ蛋白进行抗原性分析，设计引物扩增免疫原性较强片段，并在片段上引入EcoRI、SalI酶切位点。将目的片段分别插入表达载体pET30a(+)后，得到重组表达质粒pET-tgB,再将其转化大肠杆菌BL21中，经过IPTG诱导后分子量约为37ku的带有6个His标签的融合蛋白His-tgB得到了高水平的表达,薄层扫描确定融合蛋白His-tgB的表达量约为菌体蛋白的40.6%,Western blotting检测表明，His-tgB具有免疫学反应性。用纯化后的His-tgB蛋白免疫4月龄健康新西兰兔，制备了多克隆血清。对重组蛋白His-tgB过柱纯化后，作为抗原包被聚苯乙烯微量反应板，初步建立了ILTV抗体的间接ELISA检测法，其抗原最适包被量为5μl/ml。血清最适工作浓度为1:100。在最适工作条件下检测90份SPF鸡血清，统计学分析后确定本试验的判定标准为OD值≥0.15时，即判定为阳性。用该方法检测SPF鸡血清及其它鸡疫病阳性血清均为阴性。用该方法对传染性喉气管炎全病毒处理的阳性血清在1∶100稀释时，测定OD值下降了47.2%；而且，对其他疾病阳性血清的检测全部为阴性，证明该方法与其他疾病血清没有交叉反应性。该方法与ILTV全病毒抗原ELISA共同检测已知样品，其结果显示二者的符合率可达99.6%。目前，我们对400多份临床样品进行了检测，结果表明该方法可以检测免疫后的抗体变化曲线，因而可以用于ILTV感染的诊断和疫苗免疫后的抗体监测。