论文部分内容阅读
目的:采用自身对照方法,观察外用重组人表皮细胞生长因子(Recombinant human epidermal growth factor,rh-EGF)凝胶复合磺胺嘧啶银霜(Sulfadiazine Silver Cream,SD-Ag)对兔深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响,探索rh-EGF凝胶复合SD-Ag联合用药在促进创面愈合中的作用机制。方法:选取20只健康成年新西兰大白兔,2%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉,8%硫化钠背部脱毛,分别于兔脊柱两侧由前至后制作三对共6个直径3.0cm圆形深Ⅱ度烫伤创面,各创面间距2cm;每只兔创面沿脊柱由前至后定为A、B、C三组,A组:SD-Ag组、B组:rh-EGF凝胶组、C组:联合用药组,创面分别涂抹2-3mm厚药物,凡士林纱布覆盖后无菌敷料包扎,每日更换一次;分别于烫伤后4d、7d、10d、14d各处死5只兔子,肉眼观察创面愈合情况,用透明网格纸描出各组创面图形并计算创面愈合率(wound healing rate,WHR);先取痂下组织1g行痂下细菌定量,再于创面中央取材,分别行HE染色观察、免疫组化染色检测微血管密度(microvessel density,MVD)及表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)。结果:(1)WHR:各组创面随时间延长而逐渐缩小,各时间点联合用药组创面愈合率均高于单纯用药组,但烫伤4d时差异性无统计学意义(P>0.05),烫伤7d、10d、14d,C(联合用药)组创面愈合率分别为:34.54±2.69,62.72±11.52,76.16±13.60,而单纯用药组分别为:A(SD-Ag)组10.96±2.25,23.37±4.16,55.95±9.55;B(rh-EGF凝胶)组20.89±3.33,51.88±14.53,64.07±6.54,差异性有统计学意义(P<0.05);(2)HE镜下:烫伤后4d,各组残留皮肤附件破坏明显增多,皮下间质炎细胞浸润。各组炎症反应于4至7d达高峰,炎细胞主要位于表皮、真皮浅层,部分弥漫皮肤全层甚至侵犯肌肉层,7d后逐渐降低,A组、C组反应早且降低快,10d时上皮细胞岛状增生,少许毛细血管内皮细胞出芽,C组比A组、B组明显,14天创面基本上皮化,成纤维细胞数目减少,但毛细血管数目仍较多;(3)痂下细菌定量分析:烫伤后4至7d细菌数量开始减少,14d时细菌大部分被机体自身清除,以105cfu/g为基线,各组经卡方检验,A组、C组与B组差异性有统计学意义(P<0.05),而A组、C组间差异性无统计学意义(P>0.05)(4)MVD值:CD34一抗体标记显示MVD,高倍镜观察随机5个视野,以孤立的棕黄色血管内皮细胞或细胞簇代表一条单独的微血管为界定标准,结果显示:烫伤7d时各组表达快速升高,14d达高峰,三组数据各时段比较差异有统计学意义(P<0.05),B组、C组显著增加,其中C(联合用药)组呈高度表达;(5)EGFR平均光密度(average optical density,AOD):各组均满足先增加后减少的规律,烫伤7d、10d时B组、C组EGFR表达提前并明显强于A组,B组、C两组差异性不显著(P>0.05),但与A组差异性显著(P<0.05),14d时B组、C组EGFR表达弱于A组,这可能和愈后瘢痕形成有关。结论:(1)rh-EGF凝胶复合SD-Ag联合应用于创面,能很好的发挥抗菌和促进细胞增殖的协同作用,比单独用药效果明显。(2)rh-EGF凝胶复合SD-Ag联合应用于创面,形成基质,为创面愈合提供所需湿润环境同时也能抑制炎症侵润,保护创面并对控制创面感染有一定预防性作用。(3)rh-EGF凝胶复合SD-Ag联合应用,通过诱导EGFR提早表达,促进表皮细胞及血管内皮细胞形成,从而加速创面愈合。