抗幽门螺杆菌三联疗法联合益生菌治疗对肠道菌群影响的研究

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【背景】幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)是消化性溃疡的最常见也是可治愈的病因,目前共识指南强烈推荐检测并治疗消化性溃疡患者的H. pylori感染。质子泵抑制剂+克拉霉素+阿莫西林的标准三联根除H. pylori疗法在世界范围内广泛应用,但是根除H. pylori疗法可能有很多不良反应并影响肠道菌群进而影响人类健康。而适当添加益生菌制剂则可能减少不良反应及肠道菌群紊乱的发生。【目的】在标准三联疗法基础上辅助应用枯草杆菌、屎肠球菌二联活菌肠溶胶囊,初步探讨益生菌制剂降低三联疗法不良反应的疗效;探讨标准三联疗法及联合应用益生菌疗法在根除H.pylori治疗前及治疗后肠道菌群多样性的变化,研究益生菌是否能够改善肠道菌群。【方法】自2012年10月至2013年11月共纳入40例存在H.pylori感染且无并发症的活动期DU患者,随机分为标准三联治疗组(Triple treatment,TT)和标准三联加益生菌治疗组(Triple treatment+probiotic,TP),并纳入20例正常健康人作为空白对照组(Health control,HC)。TT组口服2周埃索美拉唑(20mg,bid)、克拉霉素(0.5g,bid)和阿莫西林(1g,bid);TP组口服2周埃索美拉唑(20mg,bid)、克拉霉素(0.5g,bid)和阿莫西林(1g,bid),同时口服6周枯草杆菌屎肠球菌二联活菌胶囊(0.5g,tid)。记录患者治疗前、中、后的临床症状及不良反应情况,在治疗后4周复查胃镜及13C-呼气实验。于治疗前(第0周)、治疗结束时(第2周)、治疗后4周(第6周)和8周(第10周)留取大便标本并提取细菌DNA,利用PCR方法提取16S rDNA V4区序列,通过Illumina Miseq高通量测序平台测序分析肠道菌群多样性变化。【结果】DU在中青年男性中高发,DU时胃液pH值(0.72)较正常人(1.27)明显降低,行抗H.pylori治疗后胃液pH均能恢复正常。TT组和TP组的溃疡愈合率(90%vs100%)和H.pylori根除率(80%vs85%)无差异。TT组不良反应发生率高于TP组(35%vs20%,P<0.05),主要症状是腹泻、恶心、腹痛、味觉障碍、腹胀、纳差和便秘,多数发生在治疗期间,85.7%为轻中度,所有患者均可耐受治疗。TP组能够显著改善临床症状、提高治疗耐受性并降低不良反应发生率,尤其是腹泻的发生率较TT组明显下降。16S rDNA测序分析发现HC组平均OTUs为875,TT组平均为635,TP组平均为725。在门水平上,TT组占总数0.1%以上的共注释到10个门,TP组为9个门;在属水平上,TT组占总数1%以上的共有10个属,TP组共有12个属。尽管菌群所占比例不同,两组的优势菌门相同,都是Bacteroidetes、Firmicutes和Proteobacteria,占据总菌量的96%。两种治疗方法的优势菌属不全相同,比例全不同。TT组前5位是Bacteroide(s30.3%)、Escherichia(14.9%)、Prevotella(10.7%)、Faecalibacterium(6.0%)、Parabacteroides(2.6%);TP组前5位是Bacteroides(27.1%)、Escherichia(10.0%)、Faecalibacterium(6.8%)、Prevotella(5.2%)、Phascolarctobacterium(3.7%)。抗H.pylori治疗2周可以导致肠道菌群多样性降低,尤其是Firmicutes;停药4周时两组均有恢复至治疗前水平的趋势;停药8周时TT组未再变化,而TP组继续恢复至接近于正常人水平。【结论】TP疗法能够降低TT疗法的不良反应发生率。DU时患者肠道菌群多样性降低,抗H.pylori治疗导致菌群多样性继续下降,停药4周时肠道菌群有恢复趋势,且TP组恢复肠道菌群结构方面优于TT组。
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