目的药物成瘾作为一种慢性、复发性脑病,已成为全球普遍存在的公共卫生问题,复吸作为药物依赖的重要特征,治疗药物成瘾的关键是防治脱毒后复吸。因此,本课题通过建立甲基苯丙胺戒断大鼠模型,将海马作为研究重点,探究海马中慢性甲基苯丙胺大鼠戒断后稽延性症状与GSK-3β及其磷酸化形式和节律基因Bmal1的关系,从时间生物学角度为开发有效的防复吸治疗提供新思路。方法1.选取体重介于200-250g的SD大鼠,在12h/12h昼夜循环的环境下饲养7天,随机分为甲基苯丙胺戒断组和生理盐水组并进行旷场和CPP测试。利用条件位置性偏爱箱隔天对甲基苯丙胺组大鼠腹腔注射甲基苯丙胺(3mg/kg)建立成瘾模型,生理盐水组大鼠则每天注射生理盐水(1ml/kg),共14天。之后进行旷场及CPP后测试。随后进行戒断,10天后,将两组大鼠断头取脑(ZT4),取出海马(Hip),用Western Blot方法检测GSK-3β及p-GSK3β和节律分子Bmal1的蛋白表达量。2.将SD大鼠经过7天的12h/12h光暗循环饲养之后,随机分为4组(甲基苯丙胺抑制剂组、甲基苯丙胺溶媒组、生理盐水抑制剂组与生理盐水溶媒组),在慢性甲基苯丙胺大鼠成瘾模型建立之后,用脑立体定位给药的方法在海马脑区给予GSK-3β抑制剂SB216763,戒断10天之后测旷场及CPP,并取出海马(Hip),用Western Blot检测Bmal1蛋白表达量。结果1.甲基苯丙胺组大鼠条件位置偏爱效应显著增强(p<0.05),表明甲基苯丙胺成瘾大鼠模型建立。2.旷场实验统计结果显示甲基苯丙胺依赖大鼠自主运动的总路程与中央活动路程均显著低于生理盐水组(p<0.05),表明甲基苯丙胺成瘾大鼠的探究性行为减少。3.与生理盐水组相比,甲基苯丙胺戒断后大鼠的GSK-3β与p-GSK3β的表达量降低(p<0.05),Bmal1的表达量降低(p<0.05)。4.进行脑立体定位手术之后,在生理盐水组中,抑制剂组与溶媒组中的Bmal1表达量无明显变化;而在甲基苯丙胺组中,抑制剂组大鼠海马(Hip)中Bmal1较溶媒组大鼠相比,Bmal1表达量升高(p<0.05)。结论GSK-3β与节律基因Bmal1参与甲基苯丙胺大鼠戒断后稽延性症状的产生,在海马中注射GSK-3β特异性抑制剂后,促进了大鼠成瘾的消退,使节律基因的表达量发生变化。