论文部分内容阅读
半枝莲是中医处方和成药中的常用中药,主要成分有黄酮、生物碱、二萜类化合物、甾体和多糖等,现代药理研究表明,半枝莲的粗提物及其有效部位、有效单体具有抗肿瘤、抗菌、抗突变、抗炎症、解热、抗氧化、免疫调节等多方面的药理活性。本研究采用液相色谱-二级质谱联用法（LC-MS/MS）同时测定不同产地半枝莲中野黄芩苷和芹菜素含量,采用电喷雾负模式电离（ESI-）,选定的母离子和子离子分别为野黄芩苷m/e（质荷比）461/285,芹菜素m/e 269/117,结果表明野黄芩苷浓度在2.6～72.7mg·L-1,芹菜素浓度在2.3～63.8 mg·L-1范围内线性关系良好,所测12个产地半枝莲中,野黄芩苷和芹菜素的含量范围分别为0.03%～0.39%和0.02%～0.30%。半枝莲中黄酮成分的提取纯化方法采用醇提法提取,大孔树脂法分离纯化,最后用LC-MS检测。得到两个含黄酮成分的洗脱部分为20%乙醇洗脱部分和40%乙醇洗脱部分,采用LC-MS法对其进行了检测,得到40%乙醇洗脱部分含有的主要成分为木犀草素、5,8,2′-三羟基-7-O-葡萄糖醛酸黄酮苷、4′-羟基汉黄芩素和芹菜素。黄酮苷转化为黄酮苷元实验研究。大孔树脂水洗部分主要成分为野黄芩苷等黄酮苷,以其为反应物,采用的水解条件为2 mol·L-1的盐酸,水解时间3 h,水解温度90℃,用正丁醇作为萃取剂,对转化产物进行中低压分离,得到野黄芩苷、木犀草素、芹菜素和4′-羟基汉黄芩素等苷元。对黄酮苷、黄酮苷元、大孔树脂20%和40%乙醇洗脱部分采用MTT法进行了体外细胞毒性试验,研究了其体外抗肿瘤活性,对L-929、Hela和HL-60细胞的杀伤作用实验显示,这四种供试品对L-929的有一定的细胞毒作用,但是作用不显著;大剂量对Hela细胞有一定的抑制作用,杀伤作用不明显;半枝莲黄酮苷和大孔树脂20%乙醇洗脱部分在体外对HL-60细胞有一定的杀伤作用。