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目的通过观察LPS诱导大鼠急性肺损伤的肺组织病理变化、部分炎症介质和NF-κBp65的表达，了解氧化应激、炎性细胞因子以及NF-κB信号转导通路的活化在急性肺损伤时的变化情况。进一步通过观察依达拉奉干预后急性肺损伤大鼠的肺组织病理、部分炎症介质及NF-κBp65的改变，明确依达拉奉对大鼠急性肺损伤是否具有保护作用以及可能的机制。方法健康Wistar雄性大鼠72只，随机分成生理盐水对照组（NS组，n=24）、模型组（LPS组，n=24）、依达拉奉治疗组（ED+LPS组，n=24），各组再分2h，6h和12h三个时间观测点，每组各8只大鼠。生理盐水对照组在相同的时间点注射等量生理盐水，模型组采用尾静脉注射LPS 10mg／kg诱发大鼠ALI模型，依达拉奉治疗组在LPS注射后立即注射依达拉奉3mg／kg。观察各组大鼠一般状态变化，在相应的时间点分别处死大鼠，并留取相应肺组织和血标本。测定大鼠PaO2和肺组织湿干重比，观察肺组织大体改变，显微镜观察肺组织HE染色病理切片，进行病理评分；测定肺组织匀浆中反映氧化损伤的指标包括MPO、MDA、iNOS和抗氧化指标SOD含量；ELISA法测定血清细胞因子TNF-α和IL-10浓度；免疫组织化学法检测肺组织NF-κBp65的表达情况，并进行半定量分析。结果1．一般状态观察：NS组大鼠开始呼吸稍快但很快转为平稳，未见紫绀，活动及饮水基本正常，未见异常排泻物，抓取时迅速逃避；LPS组大鼠在注射LPS后毛发竖起，极少活动，呼吸明显加快，拒绝饮水，排稀水样便，抓取时无力逃避，以6h最为明显并伴有紫绀，有两只大鼠在LPS注射后近6h时因呼吸困难死亡；ED+LPS组大鼠呼吸急促程度较LPS组轻，个别大鼠出现轻微紫绀，大鼠较LPS组活泼，可自行活动及饮水，解少量糊状便，抓取时能够逃避。2．PaO2的变化：NS组大鼠PaO2波动在104.5 mmHg左右；与NS组比较，LPS组大鼠各时间点PaO2均显著降低（P＜0.01），在LPS注射后6 h最低；ED+LPS组各时间点PaO2均高于LPS组，差异具有统计学意义，但仍低于NS组水平（P＜0.01）。3．肺组织湿干重比变化：NS组大鼠肺组织W／D波动在3.88左右；LPS组在各时间点肺组织W／D与NS组比较均显著增加（P＜0.01），在LPS注射后6 h最高；ED+LPS组各时间点肺组织W／D均较LPS组降低（P＜0.01），但尚高于NS组水平（P＜0.01）。4．病理变化：大体观察NS组大鼠两肺成均匀的粉白色，表面光滑，无出血灶，无肿胀；光学显微镜见肺泡间隔无增厚，可见少量炎性细胞，肺泡结构完整，肺泡腔清晰；NS组ALI病理评分最低。LPS组两肺出现程度不一的肿胀充血，重者可见散在出血点；光学显微镜可见肺泡间隔明显增厚，炎性细胞浸润和红细胞漏出，重者大片肺泡腔萎陷不张，肺泡腔内有透明膜形成，肺损伤在6 h最严重；LPS组各时间点ALI病理评分均高于NS组（P＜0.01）。依达拉奉治疗后使肺损伤病理改变不同程度减轻，ED+LPS组各时间点ALI病理评分较LPS组降低（P＜0.01），尚高于NS组（P＜0.01）。5．肺组织匀浆中反映氧化损伤的指标和抗氧化指标的变化：LPS组大鼠肺组织匀浆中MPO、MDA和iNOS含量同NS组比较各时间点均升高（P＜0.01），在6 h时达高峰，而肺组织匀浆中SOD含量各时间点均低于NS组（P＜0.01）；依达拉奉治疗后大鼠肺组织匀浆内MPO、MDA和iNOS含量均较LPS组降低（P＜0.01），但仍高于NS组（P＜0.01），同时依达拉奉治疗后大鼠肺组织匀浆内SOD活性较LPS组升高（P＜0.01），但低于NS组（P＜0.01）。6．血清炎性细胞因子的变化：与NS组比较，LPS组各时间点大鼠血清TNF-α浓度升高（P＜0.01），2 h达高峰，随时间推移而降低，12h仍高于NS组；依达拉奉治疗后大鼠血清TNF-α浓度较LPS组明显降低（P＜0.01），但仍高于NS组（P＜0.01）。LPS组各时间点大鼠血清IL-10含量均高于NS组（P＜0.01），随时间推移呈上升趋势；ED+LPS组血清IL-10浓度同LPS组比较无明显变化，各时间点均高于NS组（P＜0.01）。7．NF-κBp65表达：NS组可见少量散在的NF-κBp65阳性免疫反应产物，主要位于胞浆中。LPS组可见较多NF-κBp65阳性免疫反应产物，随着LPS刺激时间的不同而变化，在6h时最明显，NF-κBp65阳性免疫反应产物主要位于细胞核中，表明NF-κB被激活；各时间点NF-κB p65的IOD同NS组比较均升高（P＜0.01）。ED+LPS组NF-κB p65阳性免疫反应产物也主要位于细胞核，但表达强度较LPS组降低；各时间点NF-κB p65的IOD较LPS组降低（P＜0.01），但仍高于NS组（P＜0.01），表明经依达拉奉处理后，LPS诱导增加的大鼠肺组织NF-κB表达受到抑制。结论1．通过静脉注射LPS可以成功复制大鼠ALI模型。2．LPS注射后导致大鼠肺组织内反映氧化损伤的指标MPO、MDA和iNOS升高，抗氧化指标SOD降低；血清促炎细胞因子TNF-α升高和抗炎细胞因子IL-10早期相对不足。LPS应用后还导致肺组织NF-κB信号转导通路活化。3．依达拉奉对ALI具有保护作用。其机制是依达拉奉能清除自由基，抑制NF-κB活化，从而一方面抑制肺内炎性细胞的聚集和氧化应激，降低肺组织MPO、MDA和iNOS含量，增加肺组织SOD活性；另一方面还可以抑制LPS诱导的促炎性细胞因子TNF-α释放，而不影响抗炎性细胞因子IL-10水平。