二氧化碳对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长和转移的影响

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目的: 探讨不同压力持续性CO2气腹对人卵巢癌SKOV3细胞致瘤率,裸鼠皮下移植瘤生长曲线,移植瘤体积和重量及盆腹腔内转移情况的影响,进一步探讨CO2对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)和nm23-H1蛋白表达的影响,为CO2气腹腹腔镜手术在恶性肿瘤中应用的安全性作出评价。 方法: 体外建立模拟CO2气腹腹腔镜环境,将人卵巢癌细胞株SKOV3分别暴露于不同压力(8、10、12mmHg)和作用时间(1、3h)的CO2环境中,对照组细胞始终放入CO2培养箱中常规培养。将各组细胞收集后,分别接种于裸鼠腋下(每组10只,每只裸鼠皮下注射量为0.2mL,约含肿瘤细胞6.0×106个)。观察裸鼠皮下移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线。皮下移植瘤模型建立后6周,脱臼处死全部裸鼠。处死后均立即解剖,依次探查腹腔及盆腔器官,查看腹水及转移灶情况。完整剥离肿瘤组织并测量其体积和重量,将剥离肿瘤组织制成石蜡切片,应用免疫组织化学法检测各组标本中与肿瘤增殖、扩散、转移密切相关的PCNA和nm23-H1蛋白的表达。应用统计学方法对所得数据进行分析。 结果: 各组裸鼠致瘤率:接种7d后均明显成瘤,各组裸鼠致瘤率无差异。肿瘤生长曲线:从模型建立至接种第2周末,各组间无差异;第3周起,各CO2气体处理组的皮下移植瘤生长速度均显著快于对照组,且10mmHg压力处理组的生长速度明显快于其它压力处理组,12mmHg压力处理组的生长速度明显慢于8mmHg压力处理组。解剖结果: 各组裸鼠腹腔内均未见腹水,依次探查腹盆腔器官,均未见明显转移灶。移植瘤体积和重量:各CO2处理组的皮下移植瘤体积和重量均显著高于对照组(P<0.01);在CO2作用时间相同时,压力因素内部不同水平间差异有统计学意义(P压力<0.01),压力为10mmHg的处理组中,裸鼠皮下移植瘤的体积和重量明显高于其它压力处理组(P<0.01),12mmHg的处理组中,裸鼠皮下移植瘤的体积和重量低于8mmHg处理组(P<0.01);在CO2作用压力相同时,时间因素内部不同水平间差异无统计学意义(P时间>0.05);压力因素和时间因素之间不存在交互作用(P压力×时间>0.05)。PCNA和nm23-H1蛋白表达情况:各CO2处理组肿瘤细胞PCNA蛋白表达阳性率均显著高于对照组(P<0.01),但各处理组间差异无显著性(P>0.05)。各处理组肿瘤细胞nm23-H1蛋白表达阳性率与对照组间及各处理组内部之间差异均无显著性(P>0.05)。 结论: CO2气腹环境可促进人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤体积和重量的增加,促进PCNA蛋白的表达,即促进了肿瘤细胞的生长和增殖;但CO2气腹环境对肿瘤的转移影响不大。 意义: 我们通过将不同CO2压力和作用时间处理的人卵巢癌SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,建立了有差异的裸鼠皮下移植瘤模型,通过对这个模型的观察和研究,我们发现CO2气腹环境对恶性肿瘤的生长和增殖确实有明显的促进作用,这提示我们在临床工作中可以通过寻求更合适的气腹介质、更合适的膨隆方法,或者调节气腹压力、采取一些别的保护和预防措施来减轻CO2气腹环境对肿瘤生长的影响。
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