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目的重组FN多肽CH50可以抑制肿瘤的生长,浸润和血管形成。但其机制还不清楚。本文拟研究重组FN多肽CH50对小鼠肝癌细胞H22的侵袭能力和血管形成的影响,以探讨CH50多肽抑制肿瘤生长的可能机制。方法(1)以H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠右后腿肌肉内,建立实验性小鼠肝癌模型。(2)采用基于流体动力学的方法于荷瘤鼠体内转染表达CH50多肽,进行基因治疗。(3)通过比较肿瘤瘤重观察CH50多肽的治疗效果。(4)HE染色观察治疗后肿瘤细胞侵袭生长能力和血管形成的改变。(5)RT-PCR和明胶电泳(zymography)检测肿瘤组织边缘MMP-9 mRNA和蛋白表达及活性。(6)体外培养用CH50多肽处理过的H22细胞,检测CH50多肽对细胞粘附相关基因的表达。(7)粘附实验检测CH50多肽对H22细胞粘附纤维蛋白原能力的影响。结果(1)尾静脉注射pCH510质粒可以在小鼠体内表达CH50多肽,表达时间约持续72h。(2)小鼠体内非定位转染表达CH50多肽,对肿瘤生长具有明显的抑制作用:治疗组的瘤重明显低于两个对照组(pCDNA3.1组和Saline组),而两个对照组之间瘤重差异没有显著性;从组织水平观察,CH50多肽治疗导致肿瘤细胞大量坏死。(3)CH50多肽治疗可抑制肿瘤细胞侵袭生长,使治疗组肿瘤被局限,并能抑制肿瘤血管生成和侧支循环的建立。(4)CH50多肽不仅抑制肿瘤边缘组织MMP-9蛋白的表达水平,而且抑制MMP-9激活,但是MMP-9在mRNA水平上没有明显的改变。(5)CH50多肽可下调H22细胞的αv、β3、cdc2等基因的表达水平,(6)CH50多肽能够降低H22细胞αvβ3整合素的活性,抑制H22细胞与纤维蛋白原粘附能力。结论CH50多肽可以通过影响MMP-9和αvβ3的功能起到抑制肿瘤生长、侵袭和肿瘤血管形成的作用。