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正己醇广泛存在于食品中,是形成草腥味和豆腥味的主要成分。过量摄入正己醇会对周围神经系统造成损伤,造成头痛、头晕等症状。课题组在前期发现了一株能够有效降解正己醇的白地霉菌株,明确其产生了正己醇脱氢酶。为了进一步研究该菌株的产酶特性,本文考察了不同高级醇诱导对菌株合成正己醇降解酶以及脱氢酶的影响;分析了不同细胞部分酶降解以及脱氢酶特性,确定了相关酶类在细胞中的定位;最后通过细胞固定化技术,探索了菌体在不同环境下的作用降解表现。研究为该菌株的进一步应用奠定了理论基础。取得的主要研究结果如下:(1)正丙醇、正丁醇、异戊醇和正己醇均能诱导菌体产生正己醇降解酶。28℃下,pH7.0的10 g/L正己醇无机盐培养基诱导8 h后,菌体正己醇降解活性最强,所产酶活是未诱导的三倍。脱氢酶活性结果显示,1g/L正己醇诱导后,脱氢酶活力与未诱导相比有大幅提升,为未诱导活性1.8倍;10 g/L异戊醇诱导后脱氢酶活性最低,仅为未诱导活力的24%。(2)通过差速离心法将白地霉胞内蛋白分为细胞壁、细胞膜以及细胞质三部分,分别被命名为P27、P100以及SN100。NADH氧化酶活性显示,膜蛋白主要富集在细胞膜P100部分,并且分离过程中膜部分蛋白较少污染到其他部位蛋白。分离部位正己醇降解以及脱氢酶实验显示降解酶主要分布在P100以及P27部位,正己醇降解活力分别为3.0 μmol/min以及3.6 μmol/min;脱氢酶主要富集于SN100部位,活性0.12 μmol/min。各部位蛋白混合实验表明正己醇降解过程中存在交互作用。(3)用海藻酸钠对白地霉菌体进行固定化,对比固定化菌体和游离态菌体在不同渗透压、pH条件、乙醇以及重复利用率下,考察其正己醇降解能力变化。游离态细胞,在KCl浓度0-0.3 M,pH 5.0-9.0,乙醇浓度0-20%环境下,正己醇降解能力高于固定态细胞;固定化细胞在渗透KCl浓度0.3-1.2M,pH4.0,乙醇浓度20%-40%时,降解能力优于游离态细胞。四次利用后,游离态菌体正己醇降解活性降至初始活力的5.7%,固定态细胞活性保持着初始活性的40.5%。