目前农业部提出推进建设现代生态农业,以贯彻落实中央加强生态文明建设的要求,为发展现代生态农业,农业部提出了“一控两减三基本”的目标。为了响应“减肥”“减药”的号召,本研究进行了香蕉根际土壤抗枯萎病固氮菌的筛选.希望筛选出具有固氮作用的拮抗菌,从而为微生物菌剂的研发奠定一定的基础。以便减少化肥农药的大量施用对蕉园生态环境的破坏。本研究从香蕉根际土壤中初步分离筛选出了 266株固氮细菌,95株固氮放线菌。进一步从中筛选出了对香蕉枯萎病有拮抗作用的2株固氮细菌,一株固氮放线菌。综合菌株形态特征、生理生化特征以及测序分析结果,将菌株6N-20归类为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens),将菌株3N-25归类为绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa),将菌株8N-10归类为诺尔斯氏链霉菌(Streptomycesnoursei)。测量了筛选出的三株菌的固氮活性,在100mLAshby无氮液体培养基中培养15 d,接种菌株6N-20的液体培养基氮含量为64.67±11.13 mg/kg,接种菌株3N-25的液体培养基氮含量为37.93±10.93 mg/kg,接种菌株8N-10的液体培养基氮含量为2.27±0.88 mg/kg。经乙炔还原法测定菌株6N-20固氮酶活性为140.89±3.09nmol/mL-h;菌株 3N-25 固氮酶活性为 78.93±2.96nmol/mL-h;菌株 8N-10固氮酶活性为0.549±0.11rnmol/mL·h。用平板对峙实验和孢子萌发实验测定三株菌对香蕉枯萎病菌4号小种的拮抗活性。实验结果表明菌株6N-20的抑菌带宽度为10.5±1.22mm,对孢子萌发的抑制率为70.01%;菌株3N-25的抑菌带宽为11.4±0.97 mm,对孢子萌发的抑制率为30.13%;菌株8N-10的抑菌带宽度为15.5±0.65 mm,对孢子萌发的抑制率达75.09%。三株菌对八种香蕉常见病害的病原菌均有广谱抗菌活性。对菌株6N-20发酵液的防病效果进行了盆栽实验,结果表明,菌株6N-20发酵液的相对防治效果在67.5%左右。用荧光定量PCR方法跟踪检测了盆栽实验中病原菌含量的消长动态,只接染病原菌的一组土壤的病原菌含量先是快速增长,在接菌第21 d时土壤病原菌含量达到最大值(约10528827个/g 土)。之后在23~27 d时间内病原菌数量快速下降,当接菌27 d时病原菌含量下降到每克土中约2605032个。此后又开始缓慢升高在第31天时达到新的土壤含量最大值(约5758060个/g 土)。然后菌量又开始平缓下降,最后在每克土中约1159196个时达到相对稳定,这可能是病原菌之间经过一段时间的种内竞争后,达到一个相对的平衡状态。接染病原菌后施加接菌发酵液的一组,在前21天的时间里病原菌数量迅速下降,从每克土含量约688019.1个下降到773.4315个,说明菌株6N-20的发酵液对病原菌的生长有很好的抑制作用。之后病原菌与拮抗菌之间达到了一个动态平衡,病原菌含量一直在103附近徘徊。用荧光定量PCR对香蕉枯萎病菌数量的精确跟踪测量,为拮抗菌的拮抗机理提供一定的理论基础。在浇灌6N-20发酵液后,香蕉苗的叶绿素含量比对照高,相对电导率比对照低,可溶性蛋白含量增加,丙二醛含量少,过氧化氢酶活性增加,还原性谷胱甘肽含量增加,这些都说明6N-20发酵液对香蕉苗应对环境胁迫有有利影响。菌株6N-20发酵液能明显促进菌株的株高、茎粗、鲜重、干重和根系活力,根长也有一定的增长。