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榜嘎系毛茛科Ranunculaceae乌头属植物甘青乌头(Aconitumtanguticum(Maxim.)Stapf )或船盔乌头(Aconitum naviculare(Bruhl.)Stapf)的干燥全草,为藏医常用的乌头类药材,始载于藏医的医药古籍《月王药诊》中。其味苦、性凉、有小毒,具清热解毒功效,多入丸散用于治疗传染病发热,肝、胆热病,肺热,肠热,流行性感冒,食物中毒等;主要分布在西藏、云南西北部、青海、四川等地。榜嘎中主要含有二萜生物碱类、黄酮类、酚酸类等成分,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗心律失常等药理活性。本文对榜嘎药材的一个基原(甘青乌头Aconitum tanguticum(Maxim.) Stapf)进行了化学成分的分离与鉴定。分别采用不同的提取、分离方法对药材进行处理,将甘青乌头药材分为酸性和碱性两个分离部位。反复利用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱、制备HPLC、半制备HPLC以及重结晶等分离纯化手段分别对甘青乌头酸性、碱性部位进行系统分离,从中共分离得到30个化合物。利用物质理化性质、现代光谱学手段(UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HSQC、1H-1HCOSY、NOESY 等)共鉴定了 22个化合物。其中,从甘青乌头酸性部位分离鉴定了 7个化合物,分别为:β-谷甾醇、5-methoxy-N-Salicylanthranilic acid methyl ester*、5-hydroxy-3’,4’,5’,7-tetramethoxy flavone、麦角甾醇过氧化物、苯甲酸、邻羟基苯甲醇、阿魏酸;其中,1个为新化合物,4个为首次分离得到的化合物。从甘青乌头碱性部位分离鉴定了 15个化合物,分别为:红景天苷、guanfu-base H、二氢阿替新、syringin、苯甲醇-O-β-D-葡萄糖苷、对羟基苯甲酸、香草酸、对羟基苯乙醇、羟基酪醇、heterophyllidine、robinin、6-乙酰异叶乌头碱、异叶乌头碱、2β, 9β, 11α, 13α-tetrahydroxy-2-O-2-methylbutyryl-13-O-acetyl he tisane*、2β ,9β,11α, 13α-tetrahydroxy-2-O-2-methylbutyryl-hetisane*;其中,2 个为新化合物,3个为首次分离得到的化合物。榜嘎作为藏医常用药,疗效确切。但是由于药材来源丰富、生长环境差异性大、使用混乱,导致药材质量参差不齐,而且目前有关榜嘎药材及其制剂的质量标准都比较低下。因此本文还对榜嘎药材中的二萜生物碱和黄酮两大类成分进行了薄层色谱定性鉴别研究,以为榜嘎药材和相关制剂的质量控制提供依据。以自制的生物碱和黄酮对照品为检测指标,建立了榜嘎药材中生物碱类成分和黄酮类成分的薄层色谱鉴别标准。(1)榜嘎中生物碱类成分的薄层色谱鉴别研究取本品粉末5 g,加0.1 mol/L盐酸溶液100 mL,浸泡24小时,过滤,滤液先用氨水调碱至pH 10左右,再加氯仿萃取6次,每次100 mL,合并氯仿液,回收溶剂至干,加无水乙醇-氯仿(1:1)混合溶液1 mL溶解,作为供试品溶液。再取 2β,9β,11α,13α-tetrahydroxy-2-O-2-methylbutyryl-13-O-acetyl hetisane 对照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取对照品溶液和供试品溶液各1~5μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇(3:12:1.95)为展开剂,展开前先用氨蒸气同时饱和展开剂和薄层板20分钟,展开,取出,晾干,喷以改良碘化铋钾溶液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。(2)榜嘎中黄酮类成分的薄层色谱鉴别研究取本品粉末1g,加40%乙醇25 mL,加热回流30 min,放冷,滤过,取滤液作为供试品溶液。再取山柰酚-3-0-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖基]-7-O-α-L-鼠李糖苷对照品和槲皮素-3-0-[α-L-鼠李糖基-(1 →6)-β-D-半乳糖基]-7-O-α-L-鼠李糖苷对照品适量,加40%乙醇制成每1 mL各含1 mg的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取供试品溶液和对照品溶液各0.5~1μL,分别点于同一聚酰胺薄膜(8cm×8cm)上,以甲醇-水-甲酸(8:7:2)为展开剂,展开前先用展开剂饱和薄层板10 min,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铝乙醇溶液,热风吹干,置紫外光灯(365nm)检视。供试品色谱,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光主斑点。同时,本文还对二萜生物碱的提取、分离纯化、分析及其中的海替生型和纳哌啉型C20型二萜生物碱的波谱数据进行了分析与总结,以为今后二萜生物碱类成分的分离纯化和结构鉴定提供参考。