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背景：胰腺癌是消化道系统的恶性肿瘤，多数患者被发现时已是晚期，仅15～20％的患者有根治性手术切除机会。目前化疗仍然是治疗胰腺癌、改善预后和提高患者生活质量的一种重要的辅助治疗方法。然而不同患者对化疗的敏感性差异较大且存在着严重的多药耐药现象，从而导致化疗效果不甚理想。虽然国内外许多学者对胰腺癌多药耐药的机制进行了大量的研究，发现与细胞膜转运、能量代谢以及DNA损伤修复等相关的基因和蛋白在胰腺癌耐药过程中可能发挥作用，但尚不能完全解释其发生和作用的机制。既往大量的研究结果提示胰腺癌多药耐药现象的发生不是由单一基因或蛋白改变所引起，而可能是由多种基因或蛋白呈网络式共同作用的结果。本实验室在前期分别采用小剂量梯度递增法和大剂量药物冲击法建立了3株胰腺癌耐药细胞亚株，并通过基因芯片技术筛查出大量可能与胰腺癌多药耐药相关的基因，且对其中筛选出的部分基因在mRNA水平和蛋白水平进行验证。但到目前为止尚未发现何种基因在胰腺癌多药耐药的发生发展中起到了关键和决定性的作用。多药耐药的发生既是一种多基因调控的现象，也是一种多蛋白调控的现象，其发生往往与一组蛋白质而不是一个或几个蛋白的改变有关，况且基因的功能最终要由蛋白质来实现，因此本实验拟在前期研究工作的基础上，应用高通量筛查差异表达蛋白的实验技术—蛋白质组学技术，在蛋白水平筛查胰腺癌多药耐药发生过程中表达水平发生改变的蛋白质的种类、数量和修饰，希望找到在胰腺癌耐药发生过程中起到关键作用的一组蛋白质，从而对胰腺癌的多药耐药机制进行探讨，为今后寻找胰腺癌的治疗靶点或逆转多药耐药提供理论依据。 方法： 1．通过CCK-8比色法检测人胰腺癌细胞株SW1990及耐药亚株SW1990／FU、SW1990／ADM和SW1990／GEM的耐药指数。 2．通过双向凝胶电泳(Two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)分离亲本株SW1990及耐药亚株SW1990／ADM和SW1990／FU的总蛋白。 3．用ImgemMster图像分析软件来检测双向电泳实验的可重复性。