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目的:探讨PLA-PEG/HA-g-PLLA复合材料中不同含量HA-g-PLLA对成骨细胞黏附、增殖和成骨作用的影响,以证实PLA-PEG/HA-g-PLLA材料具有良好的成骨性能,为其在骨缺损修复中的应用奠定实验基础。方法:将四种不同质量百分比的纤维膜5%PLA-PEG、5%PLA-PEG/5%HA-g-PLLA、5%PLA-PEG/10%HA-g-PLLA、5%PLA-PEG/15%HA-g-PLLA分别设为四个实验组,另用玻璃作为对照组。将各组材料灭菌后固定于24孔细胞培养板中,每组样品设四个平行样。将鼠成骨细胞接种到预湿后的材料上,置于37℃、5%CO2培养箱中4小时,使成骨细胞较好地贴壁。取出24孔板,往每孔加入培养液1ml,继续放于培养箱中培养,隔天换液。分别在接种后的第1、4、7天对各组材料进行MTT实验,测定三个时间点的细胞增殖情况;在接种后的第4天和第7天分别进行DAPI染色实验,利用倒置荧光相差显微镜观察各组材料的细胞黏附情况;在接种后的第7天,通过碱性磷酸酶(AKP)试剂盒测定各组材料上成骨细胞的碱性磷酸酶(AKP)活性,研究材料对细胞成骨作用的影响。结果:1、鼠成骨细胞在各组材料上生长良好,分布均匀,细胞核成椭圆形或圆形,形态结构似多角梭形。2、细胞增殖实验,各组的OD值均随着时间的增长而增加,且各实验组均高于对照组,由大到小为5%PLA-PEG/10%HA-g-PLLA>5%PLA-PEG/15%HA-g-PLLA>5%PLA-PEG/5%HA-g-PLLA>5%PLA-PEG,OD值随着HA-g-PLLA添加量的增多大致呈现波形,5%PLA-PEG/10%HA-g-PLLA最接近波峰,各时间点组间比较差异均有显著统计学意义(P<0.05)。3、细胞黏附实验,DAPI染色后,倒置荧光相差显微镜下可见各实验组较对照组材料的细胞生长好数量多,同样显示PLA-PEG/HA-g-PLLA组黏附的细胞比其他组多,且随着HA-g-PLLA含量的增加呈现先增多后减少的趋势,尤其5%PLA-PEG/10%HA-g-PLLA组细胞数量最多。4、碱性磷酸酶(AKP)活性测定,测得结果仍然显示出PLA-PEG/HA-g-PLLA的碱性磷酸酶活性较高,并随着HA-g-PLLA含量的增加呈现先增高后稍微降低的趋势,各组间比较差异有显著统计学意义(P<0.05)。本课题实验中三个实验测得的结果相互吻合、相互验证,提高了本课题结果的准确性。结论:1、复合材料PLA-PEG/HA-g-PLLA能更好地促进成骨细胞的黏附、增殖和成骨作用,优于玻璃和PLA-PEG,是良好的骨缺损修复材料。2、PLA-PEG/HA-g-PLLA材料对成骨细胞黏附、增殖和成骨作用的影响在一定范围内随着HA-g-PLLA含量的增加而增大,大概在5%PLA-PEG/10%HA-g-PLLA时对成骨细胞活性的促进作用最大。