通过蛋白质组学方法寻找并鉴定日本血吸虫的循环抗原

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研发日本血吸虫疫苗被视为现有防治手段的重要补充。本研究利用高通量的蛋白质组学研究方法寻找并鉴定日本血吸虫的循环抗原。首先我们提取日本血吸虫复合成虫的所有蛋白,将所提取蛋白经过二维双向电泳(2-DE)分离。然后进行蛋白印记(WesternBlotting)分析感染血吸虫的兔的血清和虫体蛋白的免疫反应。通过将与感染血吸虫的兔血清中IgG发生免疫反应的蛋白点割下,借助使用质谱技术鉴定割胶回收的目的蛋白。即达到我们寻找的日本血吸虫循环抗原的目的。本实验鉴定的结果有6种蛋白,分别是HSP70同系物、脂肪酸/磷脂合成蛋白、肌动蛋白[Pterosperma cristatum]、SJCHGC00471protein[Schistosoma japonicum]、SJCHGC09129 protein[Schistosoma japonicum]、SJCHGC01885 protein[Schistosoma japonicum]。其中HSP70同系物和肌动蛋白在血吸虫中的功能比较明确,已有研究证明它们具有一定的免疫原性,然而脂肪酸/磷脂合成蛋白、SJCHGC00471 protein[Schistosoma japonicum]、SJCHGC09129 protein[Schistosomajaponicum]、SJCHGC01885 protein[Schistosoma japonicum]这四个蛋白研究的较少,实际上他们都是卵壳或血吸虫表皮蛋白。而这些蛋白参与了尾蚴感染宿主以及利用宿主养分、信号转导、免疫逃逸等生命过程。具有极大地研发价值。我们通过从日本血吸虫的EST文库中挑选目的基因做体外克隆表达实验,同样以感染日本血吸虫的兔血清作为抗体做Western blotting实验,验证质谱所鉴定到的循环抗原,并判断这些蛋白的潜在的疫苗价值、临床诊断以及疗效监测和愈后判断价值。
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