论文部分内容阅读
目的：探讨骨桥蛋白(OPN)在人胰腺癌中的表达及其与CD44v6、MMP-2、VEGF表达的关系，分析它们的表达与胰腺癌临床病理特性的关系，并探讨胰腺癌PANC-1细胞转染OPN-SiRNA后对细胞浸润迁移的影响及可能的机制。方法：应用RT-PCR技术检测了8例新鲜胰腺癌组织中OPN的表达；应用免疫组织化学方法检测OPN、CD44v6、MMP-2、VEGF在43例胰腺癌、相应34例癌旁组织中的表达，同时检测OPN在14例胰岛细胞瘤中的表达；采用脂质体介导的基因转染法，将含有OPN-SiRNA的质粒转染到PANC-1胰腺癌细胞株，用Western blot技术筛选阳性克隆；采用MTT法检测细胞增殖能力；MMP-2、VEGF的表达用Western blot的方法检测。结果：(1)8例新鲜胰腺癌组织中OPNmRNA的表达有6例明显高于相应癌旁组织(2)43例胰腺癌标本中OPN、CD44v6、MMP-2、VEGF阳性表达率分别为65.1％、62.7％、60.5％、53.5％，34例胰腺癌旁组织OPN、CD44v6、MMP-2、VEGF阳性表达率分别为20.6％、20.6％、23.5％、14.7％，14例胰岛细胞瘤中OPN阳性表达率为21.4％。(3)有淋巴结转移的胰腺癌组织中OPN、CD44v6、VEGF表达阳性率分别为86.7％、80％、80％，无淋巴结转移者为53.5％、53.6％、39.3％，二者相比差异均有显著性(P＜0.05)。(4)组织学分级为Ⅲ级的胰腺癌组织中CD44v6、MMP-2、VEGF在的表达率为85.7％、92.9％、78.6％，组织学分级为Ⅰ～Ⅱ级的胰腺癌组织中的表达率分别为51.7％、44.8％、41.4％，二者相比差异均有显著性(P＜0.05)。(5)肿瘤直径大于3cm的组织中VEGF的表达率为85％，小于等于3cm的组织中VEGF的表达率为26.1％，二者相比差异存在显著性(P＜0.05)。(6)CD44v6、MMP-2、VEGF与OPN的表达呈正相关，相关系数r分别为0.446、0.406及0.393(P＜0.05)。(7)转染成功后的阳性克隆株中Western blot显示OPN蛋白的表达明显下调。(8)转染成功后的阳性克隆株与亲本细胞株及转染空载体的细胞株比较，MTT显示细胞增殖能力无明显改变。(9)转染成功后的阳性克隆株与转染空载体的细胞株及亲本细胞株中比较Western blot显示VEGF表达无明显差异，MMP-2表达被明显抑制。结论：OPN在胰腺癌的浸润、转移中可能起了重要作用，它可能是通过增强MMP-2表达促进细胞外基质的降解而促进中肿瘤的浸润转移。OPN可作为判断胰腺癌浸润、转移及评估预后的指标之一，并可能作为治疗靶点。