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工作目的本研究通过细胞生物学、分子生物学和遗传学手段，分析中心体γ-tubulin及其调控因子Nek2在乳腺上皮恶变过程中各阶段的表达变化，结合相关染色体变化与乳腺癌的关系，探索乳腺癌发生演变机制，为早期癌变浸润基因治疗靶点的筛选提供理论依据。研究方法选取正常乳腺组织、不典型增生、高低级别导管内癌、高低级别浸润性导管癌组织6组共210例样本，采用免疫组化技术和流式细胞免疫荧光技术分别定性、半定量、定量检测中心体γ–tubulin和Nek2蛋白表达水平及分析其意义；采用地高辛标记mRNA原位杂交技术和实时定量反转录PCR技术分别定性、半定量、定量检测γ–tubulin和Nek2mRNA表达水平及分析其意义；采用比较基因组杂交技术，检测染色体DNA拷贝数增益和或缺失情况，并分析染色体异常区段相关基因变化。研究结果在正常乳腺组织，不典型增生，导管内癌和浸润性导管癌这个发展进程中，中心体γ-tubulin和Nek2的蛋白和mRNA表达水平呈上升趋势，在浸润性导管癌和导管内癌中显著增加。γ-tubulin和Nek2的表达呈正相关性。DNA异倍体组中γ-tubulin和Nek2的表达量明显高于DNA二倍体组。γ-tubulin中/高表达组染色体DNA异常变化数显著多于γ-tubulin阴性/低表达组。过半数不典型增生样本中γ-tubulin和Nek2的蛋白及mRNA的表达水平高，且与低级别癌样本中的表达水平无显著差异。低级别癌的染色体平均增益数、缺失数及总的变化数均明显低于高级别癌，但是与浸润性癌之间差异无显著性。不典型增生样本中染色体异常水平明显高于癌组织样本，与低级别癌样本有共同的变化位点。高级别原位癌和浸润性癌具有相同的染色体及其位点的遗传学异常，有多个共同的缺失位点。结论中心体γ-tubulin和Nek2的蛋白和mRNA异常表达可能在促使乳腺细胞过度增殖、恶变和转化的过程中起重要作用，它们可做为早期癌变浸润基因治疗的潜在靶点；不典型增生的细胞遗传学变化先于形态学上的改变，可能与低级别癌发生存在密切的遗传学联系，是潜在癌前驱病变；低级别癌和高级别癌有不同的分子遗传学改变，可能有各自的进展途径。