沙利度胺及中药组方抗CIA大鼠关节炎症及关节滑膜血管新生的实验研究

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目的:研究沙利度胺及中药组方对II型胶原诱导型关节炎(collagen type II induced arthritis, CIA)大鼠的关节炎症及关节滑膜血管新生的影响。研究对象:SD大鼠方法:首先,用II型胶原和完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)共同建立CIA大鼠模型,自造模次日起对各组治疗组分别给予沙利度胺(150 mg·kg-1·day-1×6 weeks)及中药组方(40 g·kg-1·day-1×6 weeks)灌胃,空白对照组和模型对照组分别给予等量的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)灌胃。予以药物治疗后,各组大鼠每日进行一次AI评分,于造模第六周处死大鼠,取造模对侧膝关节,关节组织采取滑膜病理学和免疫组织化学方法,检测关节滑膜的微血管密度(microvessles density,MVD);心脏采血分离血清,采用Western Blot方法检测大鼠血清内白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-1、2、3、9(matrix metallo proteinase,MMP-1、2、3、9)的表达并计算相对含量。结果:1、II型胶原和完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)共同建立CIA大鼠模型,通过AI评分、滑膜病理学和免疫组织化学检测表明造模成功,可满足本实验需要。2、CIA大鼠关节肿胀明显,模型对照组大鼠AI评分明显高于空白对照组及治疗组,血清IL-1β和TNF-α表达也明显增加;沙利度胺组与中药组方可不同程度的降低IL-1β和TNF-α的表达。3、模型组大鼠的关节滑膜组织增生,新生血管数目明显增加;沙利度胺和中药组方对关节滑膜组织增生有一定的抑制作用,使关节滑膜新生血管数目明显减少,从而降低关节滑膜MVD值。进一步研究发现沙利度胺和中药组方能抑制CIA大鼠体内VEGF和MMP-1、2、3、9的表达。结论:1、本实验使用II型胶原和完全弗氏佐剂成功构建了CIA大鼠模型。2、IL-1β、TNF-α与炎症反应密切相关,参与了RA关节炎症反应的形成和发展。沙利度胺和中药组方能通过下调IL-1β、TNF-α的表达发挥改善关节炎大鼠炎症反应和降低关节炎症指数评分,控制炎症进展。3、沙利度胺和中药组方可能通过抑制VEGF和MMP-1、2、3、9的表达而发挥抗CIA大鼠关节滑膜血管新生的作用。
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