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目的:观察肾脑复元汤对大脑中动脉栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注大鼠HPA轴功能表达的影响,研究肾脑复元汤补肾护脑法的生物学基础,并为中医药“肾脑同治”理论指导治疗神经系统疾病提供实验依据。方法:无特定病原体(specific pathogen Free,SPF)级SD大鼠120只,运用随机数字表法将大鼠分为空白组30只,假手术组30只,MCAO模型制备组60只。空白组与假手术组按处死时间分为3d、7d、14d,3个时相组,每组10只。模型制备组用改良LongaEZ等的线栓法建立大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,于缺血2h后进行再灌注,清醒2小时后神经功能评分为1~3分者评定为造模成功。假手术组处理为单纯手术而不插线。待模型造模完成后,将造模成功后的大鼠按随机数字表法分为2大组,即模型组、肾脑复元汤组后,再按处死时间分为缺血再灌注后3d、7d、14d,3个时相组,每个组每个时相保证造模成功6只动物。造模后第2天开始药物干预,肾脑复元汤组予肾脑复元汤灌胃,液体量为每次10ml/kg大鼠。空白组、模型组和假手术组灌胃等体积的蒸馏水,各组均在每天各灌胃2次,直到处死。干预结束后,应用酶联免疫吸附法检测血清CRH、CORT含量;HE染色观察脑、肾上腺组织病理学变化;免疫组织化学方法检测海马区GR表达;qPCR法检测下丘脑室旁核CRH mRNA的表达。结果:(1)神经功能评分:假手术组m-NSS评分与空白组比较无显著升高(p>0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组的m-NSS评分显著高于空白组(p<0.05)。与模型组比较,相同时间点,中药组评分低于模型组(p<0.05或p<0.01),差异有统计学意义。(2)HE染色观察脑及肾上腺组织病理学变化:与模型组比较,中药组缺血侧脑皮质神经细胞形态破坏轻,神经细胞可见少许空泡样改变,排列尚整齐,残存神经元数量较多,周围间质损伤较轻,皮质神经元和神经胶质细胞的分布大致正常;与模型组比较,中药组肾上腺皮质结构基本正常,细胞排列尚整齐,细胞内可见少许空泡样改变,细胞核、胞浆肿胀及周围间质坏死均较模型组轻。(3)免疫组织化学方法检测大鼠海马区GR表达:与空白组相比,假手术组海马GR表达无明显下降(p>0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组海马GR表达低于空白组(p<0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组海马GR表达高于模型组(p<0.05或p<0.01),差异有统计学意义。(4)ELISA法检测大鼠血清CORT、CRH含量:与空白组相比,假手术组大鼠血清CORT、CRH水平无明显升高(p>0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组血清CORT、CRH水平显著高于空白组(p<0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组外周血清CORT、CRH含量低于模型组(p<0.05或p<0.01),差异有统计学意义。(5)qPCR法检测大鼠下丘脑PVN区CRHmRNA的表达:与空白组相比,假手术组大鼠PVN区CRHmRNA水平无明显升高(p>0.05),差异无统计学意义;模型组和中药组PVN区CRHmRNA水平显著高于空白组(p<0.05)。与模型组相比,相同时间点,中药组PVN区CRHmRNA低于模型组(p<0.05或p<0.01),差异有统计学意义。结论:1.脑缺血再灌注损伤时大鼠HPA轴持续激活,CORT水平增高且与脑及肾上腺组织病理损害程度呈正相关。2.肾脑复元汤通过下调脑缺血再灌注后大鼠CRH、CORT的表达,上调海马GR水平,可以有效调控HPA轴的紊乱,改善缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损症状,促进病理修复,发挥了有效地治疗作用。