卵巢癌中OCT4、CD117表达的临床意义及PGCCs的生物学特性研究

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第一部分OCT4、CD117表达与卵巢癌临床病理特征及预后的关系研究目的:通过分析卵巢癌中OCT4、CD117的表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性,探讨OCT4、CD117表达在卵巢癌中的临床意义。方法:用免疫组化法检测70例卵巢癌中OCT4、CD117的表达,分析二者与卵巢癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:1.OCT4主要表达在细胞质,CD117在细胞膜和细胞质中表达,在卵巢癌组织中OCT4的阳性表达率为74.3%,CD117为68.6%;2.OCT4在高级别、高CA125水平(≥500U/ml)、有腹水及对化疗药物耐受的卵巢癌组织中的表达较高;CD117在高级别及有腹水的卵巢癌组织中的表达较高;3.OCT4阳性表达、有腹水者及低分化者总生存期更短;对卵巢癌患者预后有独立影响的因素包括腹水水平和分化程度。结论:OCT4可以作为预测卵巢癌患者药物敏感性及预后评估的重要参考指标。第二部分卵巢癌中PGCCs的生物学特性研究目的:对卵巢癌中PGCCs的形态及生物学特性进行观察、研究。方法:CoCl2诱导卵巢癌细胞株SKOV3细胞中PGCCs,观察PGCCs的形成过程及形态学特点;通过成脂诱导实验诱导PGCCs向脂肪方向分化;成骨诱导实验诱导PGCCs向骨组织方向分化;划痕实验鉴定PGCCs的迁移能力;检测PGCCs对化疗药物(紫杉醇)的抗性;细胞免疫化学检测肿瘤干细胞标记物OCT4、CD117在PGCCs中的表达情况。结果:1.CoCl2可以诱导SKOV3细胞形成PGCCs,其体积大,多为普通肿瘤细胞的2-3倍,核通常为巨核或多核,可通过出芽方式产生子代细胞;2.经成人骨髓间质干细胞完全培养基培养,及A液和B液的交替诱导,在第三个周期时可观察到PGCCs胞浆内有较大的空泡形成,经油红“0”染色,显示为橙红色、类圆形的脂滴;3.用成人骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基,培养20天左右,经茜素红染色后,可观察到明显的钙结节形成;4.划痕实验结果显示,无血清和10%血清培养,PGCCs均表现出更强的迁移能力,与对照组SKOV3细胞相比,有统计学差异(P<0.05);5.和对照组SKOV3细胞相比,PGCCs具有更强的化疗药物(紫杉醇)抗性;6.细胞免疫组织化学染色观测到PGCCs中有肿瘤干细胞标记物OCT4的表达。结论:1.PGCCs以分裂的方式产生子代细胞;2.PGCCs具有肿瘤干细胞的特性:多向分化潜能,强的化疗药抗性,表达肿瘤干细胞标记物。
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