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目的: 讨论低氧诱导下,FAK能否由mTERF1、CyclinD1信号通路抑制人肺动脉平滑肌细胞增殖。 方法: 将人肺动脉平滑肌细胞进行原代,利用人工设计、化学合成的人FAK、mTERF1的siRNA脂质体经Lipofectamine2000将转入人肺动脉平滑肌细胞中。将细胞分为常氧(37℃,5%CO2,21%O2)NCsiRNA组、FAKsiRNA组、mTERF1siRNA组,低氧(37℃、5%CO2、5%O2、90%N2)NCsiRNA组、FAKsiRNA组、mTERF1siRNA组。用Realtime-PCR检测细胞内FAKmRNA、mTERF1mRNA、CyclinD1mRNA的水平,Western Blot和FAK、CyclinD1、mTERF1蛋白质的表达,免疫荧光检测FAK、CyclinD1蛋白的表达,CCK8法测定细胞增殖能力。 结果: 与常氧NCsiRNA组比较,常氧FAKsiRNA组FAKmRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而mTERF1、CyclinD1mRNA及蛋白表达无明显差异(P>0.05);与低氧NCsiRNA组比较,低氧FAKsiRNA组FAKmRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而mTERF1 mRNA和mTERF1蛋白质、CyclinD1mRNA和CyclinD1蛋白质表达均减少(P<0.05); 与常氧NCsiRNA组比较,转染mTERF1siRNA后,常氧mTERF1siRNA组mTERF1mRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而FAK、CyclinD1mRNA及蛋白质表达无明显变化(P>0.05)。与低氧NCsiRNA组比较,转染mTERF1siRNA后,低氧mTERF1siRNA组mTERF1mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),低氧下CCND1 mRNA和CCND1蛋白表达减少(P<0.05),而FAKmRNA及FAK蛋白质表达改变不明显(P>0.05)。 免疫荧光检测显示常氧FAKsiRNA组与常氧 NCsiRNA组相比较,FAK是siRNA荧光表达下降明显(P<0.05),CyclinD1的荧光表达变化不明显(P>0.05)。低氧下,FAKsiRNA组较NCsiRNA组相比,其FAK荧光表达明显下降(P<0.05),CyclinD1的荧光表达也随之降低(P<0.05)。 结论: 低氧诱导下,沉默FAK可致人肺动脉平滑肌细胞mTERF1、CyclinD1表达减少,且抑制HPASMCs增殖,而沉默mTERF1后CyclinD1表达减少,FAK表达无明显改变。提示FAK是通过mTERF1/cyclinD1通路信号参与低氧状态下人肺动脉平滑肌细胞的增殖。