FAKsiRNA通过下调mTERF1、CyclinD1抑制低氧诱导下人肺动脉平滑肌细胞增殖机制的研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:longlivewebdynpro
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  讨论低氧诱导下,FAK能否由mTERF1、CyclinD1信号通路抑制人肺动脉平滑肌细胞增殖。  方法:  将人肺动脉平滑肌细胞进行原代,利用人工设计、化学合成的人FAK、mTERF1的siRNA脂质体经Lipofectamine2000将转入人肺动脉平滑肌细胞中。将细胞分为常氧(37℃,5%CO2,21%O2)NCsiRNA组、FAKsiRNA组、mTERF1siRNA组,低氧(37℃、5%CO2、5%O2、90%N2)NCsiRNA组、FAKsiRNA组、mTERF1siRNA组。用Realtime-PCR检测细胞内FAKmRNA、mTERF1mRNA、CyclinD1mRNA的水平,Western Blot和FAK、CyclinD1、mTERF1蛋白质的表达,免疫荧光检测FAK、CyclinD1蛋白的表达,CCK8法测定细胞增殖能力。  结果:  与常氧NCsiRNA组比较,常氧FAKsiRNA组FAKmRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而mTERF1、CyclinD1mRNA及蛋白表达无明显差异(P>0.05);与低氧NCsiRNA组比较,低氧FAKsiRNA组FAKmRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而mTERF1 mRNA和mTERF1蛋白质、CyclinD1mRNA和CyclinD1蛋白质表达均减少(P<0.05);  与常氧NCsiRNA组比较,转染mTERF1siRNA后,常氧mTERF1siRNA组mTERF1mRNA及蛋白质表达明显减少(P<0.05),而FAK、CyclinD1mRNA及蛋白质表达无明显变化(P>0.05)。与低氧NCsiRNA组比较,转染mTERF1siRNA后,低氧mTERF1siRNA组mTERF1mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),低氧下CCND1 mRNA和CCND1蛋白表达减少(P<0.05),而FAKmRNA及FAK蛋白质表达改变不明显(P>0.05)。  免疫荧光检测显示常氧FAKsiRNA组与常氧 NCsiRNA组相比较,FAK是siRNA荧光表达下降明显(P<0.05),CyclinD1的荧光表达变化不明显(P>0.05)。低氧下,FAKsiRNA组较NCsiRNA组相比,其FAK荧光表达明显下降(P<0.05),CyclinD1的荧光表达也随之降低(P<0.05)。  结论:  低氧诱导下,沉默FAK可致人肺动脉平滑肌细胞mTERF1、CyclinD1表达减少,且抑制HPASMCs增殖,而沉默mTERF1后CyclinD1表达减少,FAK表达无明显改变。提示FAK是通过mTERF1/cyclinD1通路信号参与低氧状态下人肺动脉平滑肌细胞的增殖。
其他文献
储备池计算是一种高效处理时间信号的仿生学研究方法。储备池计算的框架是由非线性周期性动力系统加上输入层和输出层构成。储备池计算有很多种可能的实现方法。主要介绍的是
背景:阿尔茨海默病(AD)是老年期痴呆最常见的类型,是一种以进行性认知功能障碍和记忆力损害为主的中枢神经系统退行性疾病,具有较高的致残性。其患病率随年龄增长而上升,因此,
目的:探讨三阴性与非三阴性乳腺癌细胞株之间TUSC5、RASSF1A基因启动子甲基化水平的差异,并分析其与激素受体、HER-2表达的相关性。  方法:运用焦磷酸测序法分析4种三阴性与非
本文主要从以下几个部分展开论述:  第一部分  目的:卵巢癌的病死率高居妇科恶性肿瘤的首位,而大约75%的患者在诊断时己为晚期(FIGO Ilb-Ⅳ).其中,以上皮性卵巢癌最为常见
目的:探讨窦神经阻滞对颈动脉狭窄介入治疗中所致血液动力学紊乱的防治作用。方法:将22只日本大耳白兔高脂喂饲2周后,运用颈动脉化学损伤法建立单侧颈动脉狭窄的动物模型,在
目的:应用二维超声心动图(TDE)及多普勒组织成像(DTI)技术评价不同时机的血运重建干预对急性心肌梗死(AMI)患者左心室重塑(LVRM)及收缩和舒张功能的影响。 方法:根据AMI患者