以牡丹的鳞芽、叶片和叶柄为外植体,采用正交试验设计方法,探讨不同消毒剂及消毒时间对外植体的影响;研究不同基本培养基类型、不同生长调节物质、不同附加物质和不同环境因子在牡丹鳞芽诱导、增殖和生根中的作用,找出不同培养过程中的主要影响因子以及有效浓度范围,并进一步对生根试管苗进行了炼苗及移栽研究;同时以牡丹的叶片及叶柄为外植体,探讨愈伤组织诱导与分化过程中的主要影响因子及其有效浓度范围,对由叶柄愈伤组织分化的不定芽进行生根诱导,优化愈伤组织诱导与分化的研究技术。试验结果如下:1.采用不同消毒剂和消毒时间进行消毒处理,结果表明:适合牡丹鳞芽的消毒剂为0.1%HgCl2,最佳消毒时间为8min;叶柄最佳消毒时间为5min;叶片则以3min为佳。2.以牡丹品种“大胡红”、“乌龙捧盛”和“金阁”的鳞芽为材料,研究不同基本培养基类型和不同品种对鳞芽诱导的影响,结果表明:1/2MS为最佳基本培养基,牡丹品种“金阁”诱导率最高。3.以牡丹品种“金阁”鳞芽为外植体,研究不同生长调节物质和不同浓度AC对鳞芽诱导的影响,结果表明:不同因素对牡丹鳞芽诱导率的影响不同,各因素的影响程度依次为:6-BA > NAA > AC >IAA;1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+IAA 0.3mg/L+AC 3.0g/L为牡丹鳞芽诱导的最佳培养基。4.以牡丹品种“金阁”鳞芽为外植体,研究不同基本培养基类型和不同生长调节物质对鳞芽增殖的影响,结果表明:各个因素对鳞芽增殖率的影响为:NAA >基本培养基类型> 6-BA > NAA;培养基1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L+GA3 0.2mg/L有利于牡丹鳞芽的增殖;另外,不同继代周期对牡丹鳞芽增殖倍数也有影响,以继代30d为宜。5.以牡丹品种“大胡红”、“乌龙捧盛”和“金阁”的叶片和叶柄为外植体,比较不同品种和不同外植体类型对愈伤组织诱导的影响,结果表明:同一品种,叶柄愈伤组织诱导率较叶片高;牡丹品种“金阁”愈伤诱导率最高,为64.50%。6.以牡丹品种“金阁”的叶片和叶柄为外植体,研究不同基本培养基类型对牡丹愈伤组织诱导率的影响,结果表明:适宜牡丹叶片愈伤诱导的基本培养基为1/2MS;WPM为叶柄愈伤诱导的最佳基本培养基。7.以牡丹品种“金阁”的叶片和叶柄为外植体,研究不同生长调节物质和不同浓度CH对愈伤诱导的影响,结果表明:NAA、2,4-D和6-BA是影响叶片愈伤诱导率的主要因素;适合叶片愈伤诱导的最佳培养基为:1/2MS +2,4–D 2.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+CH 300mg/L;叶柄愈伤诱导最佳培养基:WPM+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+TDZ 0.5mg/L+CH 300mg/L。8.研究不同生长调节物质和不同浓度CH对愈伤诱导的影响,结果表明:NAA、2,4-D和6-BA是影响叶片愈伤诱导率的主要因素;适合叶片愈伤诱导的最佳培养基为:1/2MS +2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+CH 300mg/L;叶柄愈伤诱导最佳培养基:WPM+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA 1.0mg/L+TDZ 0.5mg/L+CH 300mg/L。9.以牡丹品种“金阁”试管苗为材料,研究不同基本培养基的类型、不同生长调节物质、不同蔗糖浓度和不同暗处理时间对牡丹试管苗生根的影响,结果表明:各因素对于生根率的影响程度依次为:基本培养基类型> IAA> IBA >蔗糖浓度>暗处理时间;各因素对于平均根长的影响程度依次是:基本培养基类型>暗处理时间> IAA >蔗糖浓度> IBA;培养基WPM+IBA1.0 mg/L+IAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L,暗培养5d有利于牡丹试管苗的诱导;培养基WPM+IBA 1.0mg/L+IAA 0.5mg/L+蔗糖40 g/L,暗培养10d有利于牡丹试管苗根的生长。另外,以叶柄愈伤组织诱导出的分化芽为材料进行生根诱导研究,发现IBA 2.0mg/L有利于根的诱导。10.以生长健壮的牡丹生根试管苗为材料,进行炼苗及移栽试验,结果表明:在温度15~20℃、湿度85%~90%条件下,牡丹试管苗的最佳炼苗时间为12d;在珍珠岩:蛭石(1:1)基质中移栽成活率最高,达到50%。