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目的 肺癌是人类最常见的恶性肿瘤,其发生发展与多种基因异常有关,同时吸烟与肺癌关系密切。Ras基因是癌基因,FHIT基因是抑癌基因,Bcl-2/Bax为凋亡相关基因,通过研究上述基因在肺癌组织中的异常,包括Ras基因的突变激活、FHIT基因的缺失及Bcl-2/Bax基因的异常表达,探讨与吸烟及临床病理特征的关系。了解肺癌的发生机制及吸烟致癌的分子靶点,为社会控烟及肺癌预防及基因诊疗提供理论依据。 方法 随机选择36例临床确诊为肺癌且手术治疗的患者,术中采集肺癌及正常肺组织标本,置于-80℃冰箱保存新鲜组织及10%福尔马林固定标本。对每例病人临床资料进行详细记录包括术前详细的吸烟情况,术后病理特征。按吸烟情况及临床病理特征进行分组对比。分别采用以下方法对每例病人标本进行Ras、FHIT及Bcl-2/Bax基因异常情况进行研究。 （1）聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）法对新鲜冷冻标本进行K-ras基因突变情况检测,分析ras基因突变情况及与吸烟及与临床病理特征的关系。 （2）免疫组化S-P法检测福尔马林固定标本肺癌及正常肺组织中P21蛋白的山东大学博士学位论文表达情况,比较其异常表达与吸烟及临床病理特征的关系。 （3）应用RT-PCR技术检测冷冻新鲜标本中FHIT基因的异常转录情况,了解肺癌组织中FHIT基因缺失情况及与吸烟及临床病理特征的关系,以及外显子缺失的部位。 （4）免疫组化S一P法测定福尔马林固定标本FHIT蛋白的表达情况,比较肺癌组织中FHIT蛋白表达水平与吸烟及与临床病理特征的关系。 （5）免疫组化S一P法检测肺癌及正常肺组织中凋亡相关基因Bd一2和bax蛋白的表达情况,比较其异常表达与吸烟及临床病理特征的关系。 采用尸检验,应用sAs6.2软件对全部数据进行处理,p<0 .05为显著性差异。 结果 （1） Ras基因的突变在肺癌组织中明显高于正常肺组织（p<0 .01）,且吸烟组明显高于非吸烟组;鳞癌高于腺癌,淋巴结转移组突变率较高。 （2）PZ;蛋白在肺癌组织中表达水平明显高于正常肺组织,吸烟组高于非吸烟组（p<0.01）与Ras基因突变情况一致。Nsclc高于Sclc,鳞癌高于腺癌,淋巴结转移组高于非淋巴结转移组。后者提示PZI过度表达预示患者预后不良。 （3）FHIT基因在肺癌中有较高的缺失,表现为异常转录本的出现。且表现为外显子5的丢失。FHIT缺失吸烟组高于非吸烟组,鳞癌高于腺癌,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组。 （4）FHIT蛋白在肺癌组织中表达水平明显低于正常肺组织,吸烟组低于非吸烟组（p<0.01）,Sdc低于Nsclc,鳞癌低于腺癌,与淋巴结转移情况无关。 （5）凋亡相关基因Bcl一2/Bax在肺癌组织中均有异常表达,二者为负相关关系,Bcl一2在肺癌组织中为高表达,Bax在肺癌中为低表达,Bcl一2蛋白表达吸烟组明显高于非吸烟组（p<0.01）,Sclc高于Nsclc,鳞癌高于腺癌,淋巴结转移组高于非转移组;Bax蛋白表达吸烟组明显低于非吸烟组（p<0.01）,Sclc低于Nsclc,鳞癌低于腺癌,淋巴结转移组低于非转移组。 结论山东大学博士学位论文 （l）癌基因Ras、抑癌基因FHrr及凋亡相关基因Bcl一2旧ax均与肺癌关系密切,其异常在肺癌发生发展中起重要作用。 （2）Ras基因在肺癌中的异常以突变为主,FHIT基因在肺癌中的异常以缺失为主,且常常缺失外显子5。二者的异常均与吸烟有关,提示可能为烟草致癌的分子靶点。FHIT基因缺失可能成为基因治疗肺癌途径之一。 （3） PZ,及FHIT蛋白在肺癌组织中均有异常表达。前者为高表达,后者为低表达,且都与吸烟有关,可作为肺癌诊断的参考标志物,亦从蛋白水平反映了RaS及FHIT基因的异常情况。PZ,的过度表达与淋巴结转移正相关,提示病人预后不良。 （4）凋亡抑制基因Bcl一2和凋亡促进基因Bax在肺癌中均有异常表达,二者是负相关,说明凋亡作用的失衡在肺癌发生中起重要作用。二者表达与吸烟有关,提示吸烟对机体细胞凋亡亦有一定的影响。关键词肺癌基因异常Ras FHIT PZ一Bel一2 Bax