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本研究采用拌种离体叶段法对四川和云南两省的84个条锈菌株(其中四川的梓潼10个,三台8个松潘10个,苍溪2个,广元2个,盐亭10个,黑水10个,郫县10个,德昌10个和云南12个)进行抗药性监测。依据监测结果筛选出本研究所需的敏感性和抗药性菌株,菌株的EC50值小于50mg/l的为敏感菌株,菌株的EC50值大于800mg/l的为抗性菌株,从中筛选出敏感菌株2个,抗药性菌株18个;大部分菌株属于中抗菌株;供试菌株中属于敏感菌株占2.4%,耐药(抗药性)菌株占61.9%;供试菌株的平均EC50值为3.394mg/l,平均抗性水平为21.43倍,平均抗性频率在10~50倍的菌株占52.35%,云南菌株的平均抗性水平高于四川菌株,同时在用一个省的不同地区之间,菌株的EC50值也存在差异,即使是同一个地区的不同菌株之间,EC50值也不同。因此了解小麦条锈病大范围的流行趋势是非常必要的,本研究对小麦条锈病抗药性持续治理措施的制定以及杀菌剂生产和使用策略提供理论依据。
根据以上监测结果筛选出来的敏感性与抗药性菌株20个,对菌株进行基因组DNA提取,再通过等位基因特异PCR(AS-PCR)技术对供试菌株群体的CYP51全基因的PCR扩增以及CYP51基因上的136抗性位点的检测,结果发现粉锈宁的抗性不只是由单个位点基因的突变引起的。通过对不同菌株敏感性与突变位点的关系可发现,敏感性菌株CYP51基因上136位点未发生突变,而抗性菌株CYP51基因上136位点则发生了突变,所以初步认定位点突变与抗性有关。因此可将菌株的敏感性分为敏感、中抗和高抗三个梯度(敏感(EC50≤5)、中抗(550)。