违禁添加降压、降糖类药物化学发光免疫分析方法的建立

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在保健品中曝光的违禁添加药物逐渐增多,由于高血压、糖尿病患者数量巨大,不法商贩将过量的速效降压、降糖药物添加到保健品中,长期不合理的服用这类化学药物会导致严重的不良后果,甚至危及生命,因此有必要开发出快速、灵敏的检测方法用于保健品的市场监控。目前,降压、降糖类违禁添加药物的分析方法主要为仪器分析,如HPLC. LC/MS等,仪器分析具有许多应用局限,如仪器昂贵,样品处理复杂,不适合现场检测,需要专业技术人员。而化学发光免疫分析法由于其灵敏、快速、特异性等优点,有望成为降压、降糖类保健品现场快速检测的有效手段。本实验中针对降压类药物卡托普利,降糖类药物瑞格列奈、那格列奈建立了化学发光免疫分析法。针对卡托普利分子上的巯基,瑞格列奈、那格列奈分子上的羧基合成了免疫原,得到多克隆抗体,酶联免疫分析法对抗体和包被原组合进行了筛选,分别得到最优组合,在ELISA中卡托普利、瑞格列奈、那格列奈的灵敏度分别为1110.92、40.05、72.33 ng/mL。运用控制变量法对化学发光法的各个因素进行优化,发现化学发光法明显优于ELISA,卡托普利、瑞格列奈、那格列奈的灵敏度和线性范围分别为193.54ng/mL,10.16-3685.54 ng/mL.28.58 ng/mL,1-180 ng/mL.4.68 ng/mL,0.1-100 ng/mL,化学发光法的灵敏度相对于酶联免疫法都有所提高,线性范围更宽。将建立的化学发光法用于检测市售保健品,所得结果与仪器法一致。总结:本研究为检测降压降糖类违禁添加药物提供了灵敏、快速、特异性、高效的方法,可用于现场高通量的筛选检测。
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