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糖尿病(DM)已被世界卫生组织(WHO)确认为21世纪人类健康的主要杀手之一,其并发症多,危害大。其中DM血管病变在大血管和微血管均可发生,可导致临床肢体缺血性疾病和终末器官衰竭,严重影响了患者的生活质量,是糖尿病病人致死、致残的主要原因。内皮功能损伤以血管舒缩功能紊乱为主要表现,是DM血管病变的早期标志和独立的心血管危险因素。内源性阿片肽(EOPs)主要包括脑啡肽、内啡肽和强啡肽三大家族,其对应的受体分别为δ受体、μ受体和κ受体。研究已证实,EOPs及其受体在心血管系统大量存在,且心脏可以合成和释放阿片肽类物质,提示EOPs及阿片受体在调节心血管功能方面起着非常重要的作用。κ阿片受体(KOR)是心血管系统中阿片受体的主要亚型,其改变是引起心血管病变的可能因素之一。各种病因引起的心力衰竭均有显著的KOR表达减少,阿片依赖性的调节功能和心血管保护功能下降。激动KOR对缺血性心脏病、高血压和肺动脉高压等疾病均有有益的防治作用。然而目前关于KOR在DM血管病变中作用的相关研究报道较少。本研究旨在观察KOR选择性激动剂U50,488H和选择性阻断剂nor-BNI对链脲佐菌素诱导的DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能和主动脉结构的影响,检测KOR的表达变化,并初步探讨其作用机制,为防治DM血管病变提供新的理论基础和潜在治疗策略。目的:1.观察DM大鼠动脉组织上KOR的表达变化。2.观察KOR选择性激动剂U50,488H和选择性阻断剂nor-BNI对其表达的影响。3.观察激动或抑制KOR对DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能的影响。4.观察激动或抑制KOR对DM大鼠主动脉结构的影响。5.观察激动或抑制KOR对DM大鼠相关血管活性因子表达的影响。6.观察激动或抑制KOR对DM大鼠相关炎性因子表达的影响。方法:1.采用腹腔注射STZ(50 mg/kg)方法建立糖尿病大鼠模型。2.免疫组化方法检测主动脉血管组织中KOR表达的变化。3. Western blot方法检测肠系膜小动脉血管组织中KOR表达的变化。4.离体动脉血管环技术观察肠系膜小动脉血管舒缩功能的改变。5. HE染色及电子显微镜技术观察主动脉结构的变化。6. ELISA方法检测血清中AngⅡ及sICAM-1含量的变化。7. Western blot方法检测肠系膜小动脉血管组织中eNOS及NF-κB表达的变化。结果:1.大鼠主动脉上有KOR的表达,KOR主要分布在主动脉内膜上。2.与正常大鼠相比,DM大鼠主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR表达增加,腹腔注射KOR选择性激动剂U50,488H(1.0 mg/kg,1次/日,连续10日)可进一步上调主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达;而腹腔注射KOR选择性阻断剂nor-BNI(0.5 mg/kg,1次/日,连续10日)则下调了主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达。3.与正常大鼠相比,DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能发生紊乱,血管环对KCl和NE引起的收缩反应均显著增强(p < 0.05),对ACh引起的内皮依赖性舒张反应显著减弱(p < 0.05),对SNP引起的非内皮依赖性舒张反应无明显变化;肠系膜小动脉组织中eNOS表达减少而NF-κB表达增加(p < 0.01);血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平均升高(p < 0.01);HE染色光镜观察主动脉可见:内、中膜增生,平滑肌细胞排列紊乱,胶原纤维增生,内弹力板局部厚薄不均,排列紊乱,有断裂分离现象;电子显微镜技术观察主动脉超微结构可见:内皮细胞肿胀、坏死甚至脱落,平滑肌细胞增生、肥大,向内膜下层迁移,胞外胶原纤维不规则增生,弹性纤维层不规则增厚。4. U50,488H可使DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能得到明显改善(p < 0.05),肠系膜小动脉组织中eNOS表达增加而NF-κB表达减少(p < 0.01),血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平均降低(p < 0.01),主动脉的结构紊乱得到改善。5. nor-BNI处理则使DM大鼠肠系膜小动脉舒缩功能进一步恶化(p <0.05),肠系膜小动脉组织中eNOS表达进一步减少而NF-κB表达进一步增加(p < 0.01),血清AngⅡ水平和血清sICAM-1水平进一步升高(p < 0.01),主动脉的结构紊乱进一步加重。结论:1.大鼠主动脉上有KOR的表达,KOR主要分布在主动脉内膜上。2. DM大鼠主动脉和肠系膜小动脉血管组织中KOR的表达较正常大鼠明显增加,而KOR选择性激动剂U50,488H可进一步上调KOR的表达,KOR选择性阻断剂nor-BNI则下调了KOR的表达。3.激动KOR可改善DM大鼠肠系膜小动脉血管舒缩功能和主动脉结构;其机制可能包括:①增加eNOS表达,下调AngⅡ水平,从而改善内皮功能;②抑制NF-κB表达,降低sICAM-1水平,从而降低炎症水平。本研究结果为进一步研究KOR介导的DM血管病变治疗提供了潜在的治疗策略和理论依据。