【摘 要】
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增生和再狭窄是血管支架临床植入后失败的最主要原因,心血管植入材料表面的快速内皮化是避免增生和再狭窄的有效方法之一。已有报道指出血管内内皮祖细胞的归巢对血管重新内
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增生和再狭窄是血管支架临床植入后失败的最主要原因,心血管植入材料表面的快速内皮化是避免增生和再狭窄的有效方法之一。已有报道指出血管内内皮祖细胞的归巢对血管重新内皮化具有重大影响。在本论文中,在钛表面固定特异性识别和结合循环血液中的内皮祖细胞(EPC)的多肽适配子,构建内皮祖细胞的特异性识别表面,用于心血管材料的表面改性。首先,采用固相合成法合成与EPC具有特异性结合的多肽适配子,其序列为TPSLEQRTVYAK,并在羧基端进行生物素修饰。然后,通过层层自组装的方法将多肽适配子固定在钛材料表面。已有报道中指出,牛血清白蛋白(BSA)可以用于生物材料改性从而提高与血液接触材料的血液相容性。为了同时提高材料的血液相容性及捕获内皮祖细胞的能力,在层层自组装多肽适配子的过程中,也将BSA固定在了材料表面。采用石英晶体微天平(QCM),扫描电子显微镜(SEM), X射线光电子能谱仪(XPS),接触角测试仪等跟踪层层自组装的过程,对材料进行表征。血液试验结果表明,固定了牛血清白蛋白的材料表面,能够有效抑制纤维蛋白原粘附,降低纤维蛋白原激活程度,从而减少材料表面血小板的粘附数量,起到了一定的抗凝作用。内皮祖细胞体外静态实验结果表明,在钛表面通过自组装固定多肽适配子形成的生物修饰层有利于捕获内皮祖细胞,并对内皮祖细胞的粘附、生长与增殖有良好的促进作用。动物体内实验结果表明,固定多肽适配子材料表面形成了类似天然血管内膜的细胞层。机理研究表明,自组装生物修饰层钛表面有利于捕获循环血液中的内皮祖细胞,并且降低血小板的粘附数量以及激活程度,从而提高材料的血液相容性。本文提供了一种在金属材料表面固定多肽适配子的有效方法,并且对固定多肽适配子的材料进行了系统的生物学评价。体外研究证明固定了多肽适配子的材料比未改性的纯钛材料具有更优异的血液相容性,更利于EPC的粘附和增殖。动物试验结果表明,固定多肽适配子的材料表面形成了血管内膜组织。
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