目的:构建载有Lipocalin-2基因真核表达质粒pEGFP-C1和原核表达质粒pET32a(+)，观察其表达蛋白对人胚肾细胞生长的影响。 方法 利用 RT-PCR 从鼠巨噬细胞 RAW264.7中扩增目的基因Lcn-2，分别克隆入真核表达质粒 pEGFP-Cl 和原核表达质粒pET32a(+)中。用质粒pET32a(+)转化大肠杆菌E.coli.，制备重组Lcn-2。将真核表达质粒 pEGFP-C1 用脂质体转染法稳定转染人胚肾细胞，通过荧光观察，RT-PCR鉴定该基因的表达。从外源加入重组Lcn-2蛋白和真核转染胞内表达 Lcn-2 两种途径作用于人胚肾细胞，通过细胞增殖试验MTT法和免疫印迹法检测细胞增殖核抗原 PCNA 的表达，来反映Lcn-2基因的表达产物对人胚肾细胞生长的影响。 结果： 经酶切和测序鉴定，Lcn-2真核表达质粒构建成功；在重组Lcn-2最佳作用终浓度为0.5×10-6 mol/L条件下，细胞培养72h时做MTT。法细胞增殖试验，重组Lcn-2 处理组 OD 值为1.891±0.165，未处理组OD值为1.522±0.0467，二者差异显著(P＜0.0 1)，而重组质粒 PL-2组和空质粒pEGFP-C1组的OD值差异不显著(P＞0.05)；同样的条件，将细胞同时培养72h做免疫印迹实验，重组Lcn-2处理组净 OD 值为0.684±0.009，未处理组净 OD 值为0.563±0.001，二者差异显著(P＜0.05)，而重组质粒PL-2组和空质粒pEGFP-C1组的净 OD 值差异不显著(P＞0.05)。 结论 重组蛋白 Lcn-2 对人胚肾细胞增殖有一定的促进作用，真核转染质粒PL-2和空质粒pEGFP-C1 未见对人胚肾细胞有该作用。推测 Lcn-2 基因的表达产物可能通过与细胞膜受体结合促进人胚肾细胞增殖。2基因的表