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背景与目的结核性脑膜炎(Tuberculoulous meningitis,TBM)是由结核分枝杆菌引起的中枢神经系统感染性疾病,约占神经系统结核病的70%左右。其目前诊断主要依靠脑脊液常规生化、细胞学检查;然而在TBM发生的早期,脑脊液常规生化、细胞学变化多不典型,因此严重影响了TBM的早期诊治,故探讨TBM的潜在诊断标志物具有重大的临床意义。外泌体(exosomes)是一种由细胞主动分泌的大小均一,直径约30~100nm的膜性囊泡小体,具有脂质双分子层结构,广泛存在于血液、尿液、唾液、脑脊液等体液中。其内含有多种蛋白质、mRNA、miRNA等,在不同细胞间进行信息传递,发生多种生物功能。外泌体在中枢神经系统中参与正常的生理条件以及介导病理状态,在中枢神经系统的疾病的发生、发展及损伤修复中起着重要作用。微小RNA(mi RNA)是一类内源性非编码的小分子单链RNA,其主要功能是从转录后水平调节基因的表达,广泛参与多种生物的生命过程。Let-7家族是miRNA重要的组成部分之一,其包含13个成员,其中let-7d在大脑中的表达水平非常高,在多种神经系统疾病中起着重要作用,可能成为某些疾病的潜在生物学标志物。本研究通过分离临床上常见的病毒性、化脓性、结核性脑膜炎患者以及正常对照者脑脊液中的外泌体,来探讨let-7d在四种脑脊液外泌体中的表达水平,以寻求TBM新的潜在诊断标志物。材料与方法随机收集我院15例结核性脑膜炎患者(结脑组,TBM组)、20例病毒性脑膜炎患者(病脑组,VM组)、10例化脓性脑膜炎患者(化脑组,PM组)以及20例正常脑脊液患者(对照组)的脑脊液。采取ExoQuick Precipitation提取法分离并纯化外泌体。通过透射电镜观察其形态,采用实时定量PCR法检测其let-7d表达水平。结果1.三种脑炎患者及正常人脑脊液中均发现外泌体,电镜下呈圆形、椭圆形或茶托状外形,直径约30~100nm,实时定量PCR法检测发现其内含有不同程度表达水平的let-7d。2.结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中let-7d的表达水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.let-7d表达水平在结脑组、化脑组与对照组相比均明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05);病脑组与对照组相比也下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。4.let-7d表达水平在化脑组与结脑组相比明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.let-7d表达水平在结脑组与病脑组相比明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论中枢神经系统感染性疾病的脑脊液中可分离出外泌体,通过比较三种脑炎以及正常对照者外泌体中let-7d的表达水平,发现在TBM患者中let-7d的表达水平显著下调,为其诊断提供潜在的生物学标志物。