硅藻中多不饱和脂肪酸提取分离及免疫调节作用的研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:aihaiyuguijing
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多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids, PUFAs),在营养强化、防治心脑血管疾病、免疫调节等方面起着十分重要的作用。本论文对一株海洋微藻硅藻(Nitzschia laevis)中的PUFAs进行分离纯化,并对纯化后的PUFAs进行了免疫调节作用的研究。通过气相色谱法测定硅藻中脂肪酸的组成为:C14:0、16:0、C16:1、C18:1、C18:2、 C18:3ω-3、C18:3ω-6、C20:4ω-6、C20:5ω-3。其中PUFAs主要由花生四烯酸(Arachidonic acid, ARA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid. EPA)及少量的C18:ω-3和C18:3ω-6组成,这几种PUFAs在总脂肪酸中的含量分别为7.19%、18.73%、0.92%和0.85%。使用酸催化法对硅藻中提取得到的脂肪进行乙酯化实验,通过试验确定脂肪酸乙酯化的最佳条件为:反应温度85℃,反应时间1.5小时,酯化率为90%。采用柱层析法对硅藻中的PUFAs进行了分离纯化,使用硝酸银-硅胶作为吸附剂,氯仿-丙酮溶液作为洗脱液。使用此法得到的PUFAs的纯度为97.15%以上,回收率为79%。MTT法检测了PUFAs对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。研究发现,PUFAs可以促进脾淋巴细胞的增殖,并有一定的剂量依赖性,其最佳作用剂量为1μg/mL分别探讨了PUFAs对正常小鼠和环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫调节作用,小鼠连续灌胃PUFAs20天后测定免疫器官指数、巨噬细胞吞噬能力、迟发型超敏反应和半数溶血值。研究结果表明PUFAs对小鼠特异性细胞免疫,体液免疫以及非特异性免疫功能均有明显的促进作用,能增强小鼠的免疫功能。
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