背景:贫血(anemia)是一种世界上常见和多发的血液疾病,全球约有20亿人口受累。每年因贫血疾病导致的各类疾病死亡人数近上千万,而我国贫血人口要明显高于欧美国家,约占全球的37%。在我国贫血人群中,女性(包括孕妇)明显高于男性;老人和儿童明显高于中、青年,增长人数并呈逐年累加趋势。该病临床症状主要包括身体虚弱、面色苍白、伴有头昏、乏力、疲劳、晕厥、体重下降和呼吸急促等。这不仅给患者带来了身体上的痛苦,也给社会及个人造成了严重的影响和经济负担。目前,性别因素对贫血的发生发展以及治疗的影响还未有过研究报道,也并未有针对性地解决方案。因此,探索性别因素对应激性红细胞生成的影响就显得非常重要,这更利于我们了解不同性别之间的贫血差异,提出个性化贫血疗法。造血干细胞移植(HSCT)是多种贫血疾病的确定性治疗方案,但目前HSC供体紧缺及体外扩增数量不足。因此,提高体外扩增人原代造血干细胞的效率,是解决限制造血干细胞移植治疗应用的关键所在。这将为贫血疾病的治疗提供有效的方案,以及在未来的研究中提供可靠的贫血细胞模型。目的:(1)观察性别因素对苯肼(PHZ)致小鼠溶血性贫血模型影响;(2)观察性别因素对5-氟尿嘧啶(5-FU)致小鼠再生障碍性贫血模型影响;(3)探索红细胞前体细胞在体外扩增的培养方案。方法:(1)将10-11周龄健康的C57BL/6小鼠经腹腔注射120 mg/kg体重PHZ溶液,于注射前第3天和注射后第3、5、7、9、14天进行颌下静脉采血,并在第3天摘除小鼠脾脏进行比较分析;最后,将收集的外周血采用全自动兽用血细胞分析仪检测红细胞(RBC)和白细胞(WBC)相关指标的变化。(2)将10-11周龄健康的C57BL/6小鼠经腹腔注射150 mg/kg 5-FU溶液,于注射前第5天和注射后第3、5、7、9、14、17、21、26天进行颌下静脉采血,并在第5天摘除小鼠脾脏进行比较分析;最后,将收集的外周血采用全自动兽用血细胞分析仪检测红细胞(RBC)和白细胞(WBC)相关指标的变化。(3)收集人血液样本,采用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞,并在体外进行三阶段培养,通过细胞计数、流式分析、吉姆萨染色来观察细胞的生长状态及所处的不同阶段。结果:(1)PHZ注射后第3天,雌性和雄性小鼠均表现出相同程度的急性溶血性贫血症状:皮肤黏膜颜色苍白、出现血红蛋白尿、体重下降、RBC数量和红细胞压积(HCT)均显著性降低。PHZ注射后各时间点不同性别小鼠外周血的WBC数量、淋巴细胞数量、单核细胞数量、粒细胞数量无明显差别。然而,PHZ注射后第3天,雌性小鼠脾脏代偿性增大的程度显著高于雄性小鼠;PHZ注射后第9天,雌性小鼠的RBC数量、HCT和血红蛋白含量(HGB)也都显著性地高于雄性小鼠。(2)5-FU注射前及注射后,小鼠脾脏颜色、脾脏质量/体重质量比,以及红系相关指标均无显著差异;在5-FU注射后第14天,雄性小鼠的单核细胞数、中性粒细胞数均显著性地高于雌性小鼠。(3)在三阶段培养方案中,人的外周血单个核细胞的生长状态良好,在第2天可检测到许多造血干细胞;第14天时,造血干细胞可分化成原红细胞;第21天时处于红系分化阶段;而在第24天时,红系前体细胞占比约为50%。结论:(1)性别对PHZ所致小鼠溶血性贫血模型的建立无明显影响;但PHZ引发的应激性红细胞生成过程存在性别差异:雌性小鼠RBC的恢复速率强于雄性小鼠。(2)性别对5-FU所致小鼠再生障碍性贫血模型的建立无明显影响;但雄性小鼠WBC代偿速率要强于雌性小鼠。(3)采用三阶段培养方案,可以有效地从外周血单个核细胞中扩增出红细胞前体细胞。