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目的:尤文肉瘤(Ewing,s sarcoma,ES)是一类恶性程度高极易转移的肿瘤,好发于青少年,病灶常见于长骨末端和软组织。近年来,随着治疗手段研究的深入,对局限性尤文肉瘤的治疗有了明显改观,但是发生转移和局部切除复发的患者仍急切需要新的治疗方法。目前,靶向治疗给多种肿瘤,尤其是对中晚期肿瘤患者带来了希望。胰岛素样生长因子1受体(Insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)在尤文肉瘤发生过程中起重要作用,是潜在的治疗靶点,而靶向IGF1R已经针对尤文肉瘤正在进行临床实验,并且发现对部分病人有效。遗憾的是耐药和复发成了靶向IGF1R在尤文肉瘤治疗中的瓶颈,因此提高IGF1R抑制剂和抗体的药效,减少耐药和复发,才有可能使其在尤文肉瘤中应用。天然产物在药物的发现和发展中发挥着关键作用,β-榄香烯是从姜科植物莪术中提取的化合物,对许多肿瘤有杀伤作用,且毒副作用小。其主要生物学功能有:减缓肿瘤细胞的有丝分裂、抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞凋亡。而目前关于β-榄香烯对尤文肉瘤的作用,或对IGF1(Insulin-like growth factor 1)诱导的细胞增殖作用尚未见报道。本课题联合β-榄香烯和无效浓度的IGF1R抑制剂处理尤文肉瘤细胞,以弄清β-榄香烯是否能够提高IGF1R抑制剂对尤文肉瘤细胞的杀伤作用,探索在尤文肉瘤中联合应用二者的可行性,并对处理后细胞内凋亡、自噬相关通路进行研究,以弄清作用的分子机制,有望为尤文肉瘤的治疗提供新线索。方法:采用两株尤文肉瘤细胞系(A673和MHH-ES1),以β-榄香烯和IGF1同时处理细胞,通过体外细胞毒实验观察β-榄香烯对IGF1诱导的尤文肉瘤细胞增殖作用。联合应用β-榄香烯和无效浓度的IGF1R抑制剂处理细胞,通过体外细胞毒实验观察对尤文肉瘤细胞增殖的影响,并通过免疫印迹法检测PI3K-Akt-mTOR信号通路重要分子的活性及凋亡、自噬相关蛋白表达。结果:1.IGF1处理可诱导A673细胞增殖,同时用β-榄香烯处理后,细胞增殖受抑,而且呈浓度和时间依赖性;在MHH-ES1细胞中也得到了同样的结果。2.联合β-榄香烯和无效浓度的IGF1R抑制剂(PPP和NVP-AEW541)处理尤文肉瘤细胞A673和MHH-ES1,细胞增殖受到显著抑制,且抑制效果明显强于β-榄香烯和IGF1R抑制剂的单独处理。3.联合β-榄香烯和无效浓度的IGF1R抑制剂(PPP)处理尤文肉瘤细胞A673后,AKT、PRAS40和S6蛋白的磷酸化受到明显抑制,PARP活化型水平增高,LC3I向LC3II转化增强且Atg7表达水平下调。结论:β-榄香烯对IGF1诱导的尤文肉瘤细胞增殖有显著抑制作用;β-榄香烯和IGF1R抑制剂联合处理尤文肉瘤细胞可明显提高IGF1R抑制剂或β-榄香烯的杀伤作用;β-榄香烯和IGF1R抑制剂联合处理尤文肉瘤细胞抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路活性、诱导凋亡和自噬相关分子活化。有望为尤文肉瘤的治疗提供新思路。