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目的:运用niRNA基因芯片技术检测寻常型银屑病患者(Psoriasis Vulgaris,PV)外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中小分子RNA(microRNAs, miRNAs)的表达谱系,筛选其与正常人PBMC中差异性表达的miRNAs,对部分差异性miRNAs进行荧光实时定量PCR(RealTime quantitative PCR,RT-qPCR)验证。运用定量蛋白芯片技术检测PV患者血浆中40个细胞因子(Cytokines, CK)的表达情况,筛选其与正常人血浆中差异性表达的CK。同时研究竹黄颗粒治疗PV的临床疗效以及对差异性rniRNAs和CK表达的干预作用,探讨miRNAs和CK在寻常型银屑病中的作用机制,探索中医药治疗银屑病的作用新靶点,为中医药防治银屑病提供新的理论和实验依据。方法:1.采集5例PV患者和5例健康志愿者PBMCs后,用Trizol法提取RNA,运用Affymetrix miRNA2.0芯片检测PV患者和正常人PBMCs中miRNAs6勺表达谱系,运用聚类分析软件(cluster3.0)分析差异性表达的miRNAs。2.采集20例PV患者和10例健康志愿者PBMC,运用RT-qPCR方法对部分差异性miRNAs进行验证。3.采集25例PV患者和15例健康志愿者血浆,运用Raybiotech定量双抗体夹心蛋白芯片(QAH-INF-3-2)技术检测40个CK的表达情况,运用聚类分析软件(cluster3.0)分析差异表达的CK。4.对25例PV患者应用竹黄颗粒治疗8周,采集患者治疗前后的PBMCs和血浆,运用RT-qPCR技术检测部分差异性miRNAs,运用Raybiotech定量双抗体夹心蛋白芯片(QAH-INF-3-2)技术检测差异性CK。探讨差异性miRNAs和CK与PV病情程度的相关性,分析竹黄颗粒对差异性miRNAs和CK的干预作用。结果:1.PV患者PBMCs中有39个miRNA呈差异性表达,其中miRNA-146a、miRNA-31、miRNA-192-5p、miRNA-21和miRNA-155等26个明显上调(q<0.05),miRNA-99a、miRNA-200c、miRNA-125b、 miRNA-1224-5p和miRNA-617等13个明显下调(q<0.05)。2与正常人比较,PV患者PBMCs中miRNA-146a、miRNA-31、 miRNA-192-5p表达均上调,差异均有显著性意义(p<0.05),miRNA-99a、miRNA-200c表达均下调,差异均有显著性意义(p<0.05),与miRNA基因芯片结果一致。3.与正常人比较,PV患者血浆中有26个细胞因子呈差异性表达,其中MIG、MCP-1、MIP-1β、 TNFβ、TNF sRI和TNF sRⅡ等18个表达明显上调(q<0.05), Eotaxin、PDGF-BB、RANTES和IL-6sR等8个表达明显下调(q<0.05)。4.竹黄颗粒治疗PV患者8周后,PASI积分明显下降,与治疗前比较差异有显著性意义(p<0.05),临床总有效率为80%。治疗结束后对5个差异性miRNAs表达情况与治疗前进行比较,miRNA-146a表达下调,miRNA-99a表达上调,差异有显著性意义(p<0.05)。治疗结束后对26个差异性细胞因子表达情况与治疗前进行比较,PDGF-BB和RANTES表达上调,TNF-α、MIP-1δ.TNF sRⅡ和ICAM-1表达下调,差异有显著性意义(q<0.05)。5.miRNA-146a表达水平与PASI呈正相关(p<0.05),miRNA-99a表达水平与PASI呈负相关(p<0.05)。PDGF-BB水平与PASI呈负相关(p<0.05),TNF-α、MIP-1δ和ICAM-1水平与PASI呈正相关(p<0.05)。结论:1.PV患者PBMCs中miRNA-146a、miRNA-31、miRNA-192-5p等26个miRNAs表达上调,miRNA-99a和miRNA-200c等13个miRNAs表达下调。39个差异性miRNAs可能在银屑病的发病机制中占有重要地位。2.PV患者血浆中TNF-a、ICAM-1和MIP-1δ等18个细胞因子水平表达上调,PDGF-BB和RANTES等8个细胞因子水平表达下调。细胞因子网络在银屑病的发病机制中有重要意义。3.miRNA-146a、miRNA-99a、PDGF-BB、TNF-α、MIP-1δ和ICAM-1水平与PV皮损症状严重程度密切相关,可以作为判断病情和临床疗效的生物学指标之一。4.竹黄颗粒治疗PV疗效显著,它可能是通过双向调节miRNA-146a、miRNA-99a和TNFα、MIP-1δ、TNF sRⅡ ICAM-1PDGF-BB、RANTES等细胞因子的表达水平而发挥作用机制。