目的：临床上肿瘤病人耐药是一个相当棘手的问题，了解耐药机制迫在眉睫。miR-21可能在结肠癌耐药机制中发挥重要作用，本研究即以探索结肠癌5-Fu耐药机制的新线索为目的，可能为临床个体化治疗提供新的预测指标。方法：本研究选用人结肠癌HT-29细胞系进行实验，经携带不同基因片段的慢病毒转染细胞以调节miR-21的表达及作用，采用荧光素酶报告系统验证hMSH2为miR-21的潜在靶点。此外还采用TaqMan探针法qRT-PCR及Western Blotting两种技术方法分别从RNA水平及蛋白分子水平来检测随着miR-21的调节5-Fu代谢相关酶及hMSH2表达量的变化。结果：1、荧光素酶报告基因检测hMSH2为miR-21的潜在靶基因。miR-21下调组荧光素酶活性明显增强（p<0.001），而miR-21上调组的荧光素酶活性明显减弱（p<0.001），结果表明miR-21能够直接靶向结合于hMSH2的3’UTR端。2、TaqMan探针法实时荧光定量PCR从RNA水平进一步验证了miR-21对hMSH2的靶向作用，此外还表明miR-21与TP酶、DPD酶的表达存在负性调节作用（p<0.05）。3、在蛋白水平上通过Western Blotting发现miR-21对hMSH2以及TP酶、DPD酶表达的影响趋势与RNA水平相一致，但对TS酶的表达无明显影响。结论：hMSH2是miR-21的潜在靶基因，同时miR-21可能参与了TP酶及DPD酶表达的部分调节过程，这在结肠癌对5-Fu的耐药过程中可能发挥了重要的作用。因此miR-21也许能够成为结肠癌患者是否接受5-Fu方案化疗的预测因子。