论文部分内容阅读
目的:大豆苷元（7,4’-二酚羟基异黄酮,daidzein,DD）又名大豆黄素、黄豆苷元,是大豆异黄酮（soybean isoflavones,SIF）的主要组成成分,具有类雌激素样作用。然而DD的水溶性和脂溶性均较差,影响了其在肠道中的吸收,导致口服生物利用度低。磷脂复合物（phospholipid complex,PLC）是药物与磷脂分子通过电荷迁移作用形成的较为稳定的分子间络合物。难溶性药物与磷脂复合有利于改善药物与细胞膜的亲和力,从而可提高药物的生物利用度,但PLC具有较强的疏水性,水中分散性差,故而利用固体分散技术将PLC制备成固体分散体（solid dispersion,SD）可有效提高PLC的亲水性,由此可进一步提高难溶性药物的口服生物利用度。本课题以DD为模型药物,通过构建其磷脂复合物之固体分散体（PLC-SD）,拟达到提高DD口服生物利用度的目的,以期为磷脂复合与固体分散联用技术应用于大豆异黄酮和其他黄酮类药物的可行性提供研究依据。方法:1.以复合率为评价指标采用正交设计法优化大豆苷元磷脂复合物（DD-PLC）的处方及制备工艺,再以溶出度为评价指标进行大豆苷元磷脂复合物之固体分散体（DD-PLC-SD）的处方筛选;通过差示扫描量热分析（DSC）、红外光谱（IR）、X射线衍射（XRD）及扫描电镜（SEM）等表征方法进行物相鉴定。2.建立高效液相色谱法（HPLC）测定DD含量的方法,通过表观溶解度、油水分配系数及溶出度的测定,考察DD-PLC和DD-PLC-SD的溶解性及体外溶出性能。3.建立大鼠离体外翻肠囊模型,以累积吸收量（Q）、吸收速率常数（Ka）和药物吸收率（V）为评价指标,考察DD、DD-PLC和DD-PLC-SD在空肠、回肠、结肠的吸收特性。4.建立HPLC法测定大鼠血浆中DD含量的分析方法,以原料药作为参比,对DD-PLC和DD-PLC-SD灌胃给药后在大鼠体内的药动学及生物利用度进行评价。结果:1.通过正交设计得出的DD-PLC的最佳制备工艺为:四氢呋喃为反应溶剂,DD反应浓度2.5mg/ml,DD与磷脂的投料比1:3.5,反应温度55℃,反应时间1h,在该条件下DD与磷脂的复合率达到94.18±0.91%。筛选出的DD-PLC-SD的处方为:聚维酮K30（PVP K30）为载体,DD-PLC与PVP K30的质量比为1:3。DSC、IR、XRD和SEM的表征结果表明DD-PLC与DD-PLC-SD制备成功。2.DD-PLC-SD在水中和正辛醇中的溶解度分别为原料药的19.3倍和6.7倍,油水分配系数为原料药的8.4倍;体外溶出实验结果表明,在3种pH条件下DD-PLC-SD的溶出度均较原料药有显著提高,在pH=6.8的PBS缓冲液中DD-PLC-SD在1h内的累积溶出率达到75%以上,而原料药在同条件下3h内的累积溶出率不足20%。与原料药相比,DD-PLC的溶解度、油水分配系数和溶出度亦均有所提高,但提高程度不如DD-PLC-SD显著。3.DD-PLC-SD在各肠段的Ka显著高于原料药（P<0.05）,DD-PLC在空肠和回肠的Ka显著高于原料药（P<0.05）;DD-PLC-SD在结肠的Ka显著高于DD-PLC（P<0.05）。各时间点的Q和V的数据表明,在不同肠段DD-PLC与DD-PLC-SD的吸收效果均优于原料药,而DD-PLC和DD-PLC-SD在空肠和回肠的吸收效果无明显差别。4.所建立的HPLC法测定大鼠血浆中DD含量的分析方法,血浆内源性物质无干扰,方法学考察结果符合生物样品检测要求。药动学研究结果表明,DD、DD-PLC和DD-PLC-SD在大鼠体内的药动学过程均符合一室模型,三者的达峰时间(tmax)分别为（116.67±15.16）min、（43.39±11.28）min和（36.67±9.10）min,峰浓度(cmax)分别为（0.17±0.09）μg/ml、（0.39±0.06）μg/ml和（0.68±0.04）μg/ml,DD-PLC的相对生物利用度（Fr）为476.6%,DD-PLC-SD的Fr为925.5%。可见,将DD制成PLC或PLC-SD后,在大鼠体内的吸收速度明显加快,生物利用度显著提高,而DD-PLC-SD较之DD-PLC具有更高的生物利用度。结论:本课题成功构建并评价了DD-PLC-SD。将DD制成PLC-SD可显著提高其溶出性和肠壁透过性,从而可大幅提高口服生物利用度。研究结果表明,在磷脂复合物的基础上再制成固体分散体有助于进一步提高DD的口服生物利用度。本课题对磷脂复合与固体分散联用技术应用于大豆异黄酮和其他黄酮类药物的可行性提供了研究依据。