研究目的研究自、异体小皮片混合移植方法于大鼠背部全层皮肤缺损创面,观察其对创面愈合的影响,初步探索自、异体小皮片混合移植后异体皮片示踪的方法。研究方法制作大鼠全层皮肤缺损创面模型,以自、异体小皮片混合移植于创面。并与自体小皮片及异体小皮片移植对照,观察移植术后1、2、3、4周创面移植皮片的存活及其生长情况,计算各组大鼠创面愈合率、收缩率,HE染色观察各组创面组织学变化过程以及差异。以雌性大鼠为受体,雄性大鼠为供体进行自、异体小皮片混合移植,以PCR技术跟踪移植异体皮的Y染色体特异性片段,判断异体皮片移植与自、异体皮片混合移植后,两组移植的异体皮片的转归。以绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)转基因小鼠为供体,普通小鼠为受体进行皮肤移植,利用激光共聚焦显微镜(laser confocal scanning microscope, LSM)以及小动物活体成像系统(small animal in vivo imaging system)对异体皮片移植与自、异体皮片混合移植后,两组移植的异体皮片进行示踪。结果皮片存活情况：移植后第1周,各组皮片与移植床粘附良好,无明显移位以及感染迹象,各组间无明显差异。自第2周始,自体移植组移植的皮片逐渐相互融合；混合移植组移植的异体皮表面有黄色干痂或皮屑脱落,少数创面表面溃破,周围自体表皮爬行其上；异体移植组移植的皮片肿胀,发黑,逐渐坏死脱落。至移植后第4周,自体移植组与混合移植组创面已基本上皮化,异体移植组皮片消失殆尽,形成肉芽创面。创面愈合率：整个愈合过程中,混合移植组与自体移植组愈合率无显著性差异。移植后2周始混合移植组创面愈合率高于异体移植组(P<0.05),第3周时此差异更加明显(P<0.01),到第4周混合移植组以及自体移植组创面已经完全愈合,而异体移植组仍为肉芽创面。创面收缩率：移植后3组各组创面均有不同程度的收缩,但无统计学差异。组织学观察：自第2周始,异体移植组可见大片表皮细胞变性坏死、中性粒细胞浸润等剧烈排斥反应,到第4周,仍有炎性细胞浸润以及肉芽组织增生,而混合移植组移植的异体皮片排斥反应始终轻微,到第3-4周,创面基本由增生的上皮覆盖。异体皮示踪方法的探索：异体移植组移植后第3周,混合移植组移植后第4周开始运用PCR技术跟踪异体皮内Y染色体特异性片段,在异体移植组移植后3周时为阴性,混合移植组移植后6周时仍然有检出。以绿色荧光蛋白转基因鼠作为供体,运用激光共聚焦显微镜检测荧光表达示：术后第14天,异体移植组与混合移植组均可见到绿色荧光；第21天异体移植组未见到、混合移植组可见到绿色荧光；第28天,两组均未见到绿色荧光。运用小动物活体成像系统检测荧光表达示：异体移植组与混合移植组绿色荧光表达均在14天内消失。结论该模型模拟临床实践,较好的展现了自、异体小皮片混合移植全层皮肤缺损创面及其愈合过程,为进一步研究其机理及改进此方法奠定了基础。Y染色体特异性片段检测以及绿色荧光蛋白转基因鼠作为皮片供体,可作为进一步研究的混合移植后异体皮的示踪方法。