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研究目的:儿童睡眠呼吸暂停低通气综合症(obstructive sleep apnea hyponea syndrome,OSAHS)是一类由于结构异常或功能异常引起的上气道阻塞而导致的睡眠时呼吸暂停和通气不足,儿童OSAHS最常见的原因是扁桃体腺样体肥大。腺样体组织属于上呼吸道黏膜相关淋巴系统,腺样体暴露于气道,受多种外界刺激后发生免疫激活,启动免疫反应,局部效应免疫细胞和调节免疫细胞之间平衡的异常导致炎症反应迁延不愈,久之引起腺样体增生肥大。已知Th1/Th2平衡在腺样体肥大发病中有重要作用,目前针对腺样体组织局部Treg,Th17的相关研究甚少。因此本课题设计了本研究,测定腺样体肥大患儿外周血及腺样体组织局部Th17,Treg细胞数目,Th17功能因子IL-17;Treg特异性转录因子Foxp3,Treg抑制功能相关因子IL-10,TGF-β的含量,比较不同程度腺样体肥大组之间各指标有无统计学意义,从而分析Treg/Th17平衡在腺样体肥大发病中有无作用,是何种作用,为进一步腺样体局部免疫平衡的研究打下基础,也为腺样体肥大发病机制的研究提供依据。儿童过敏性鼻炎及分泌性中耳炎发病率极高,且常与儿童腺样体肥大发病同时存在。已知Treg,Th17的异常与过敏性鼻炎发病相关,故本研究设立了腺样体肥大合并过敏性鼻炎病例组,腺样体肥大合并分泌性中耳炎组,腺样体肥大合并过敏性鼻炎及分泌性中耳炎组,初步探讨Treg在儿童腺样体肥大及其相关合并症中的关系。研究方法本研究为随机病例对照研究。一研究对象研究对象为2013年9月-2013年12月,就诊我医院儿童177例,经询问病史、排除了心血管、内分泌、泌尿系统、代谢性疾病及神经肌肉病。所选病例均无阿司匹林特异性反应、支气管扩张、自身免疫性疾病等典型病史。2周内无上呼吸道感染,询问过敏性鼻炎哮喘等过敏性疾病史,进行多导睡眠监测(polysomnography,PSG)判断是否为阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征,入院均进行常规手术前检查,排除手术禁忌症,并进行皮肤点刺试验测定过敏原,纤维鼻咽镜检查腺样体大小,声导抗检查中耳情况。纤维鼻咽镜检查,根据腺样体堵塞后鼻孔的程度进行分组,堵塞后鼻孔0-25%为Ⅰ度,26%-50%为Ⅱ度,51%-75%为Ⅲ度,76%-100%为Ⅳ度[2]。PSG结果评定:根据2007年中华耳鼻咽喉头颈外科杂志发表的《儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症诊疗指南》,阻塞性呼吸暂停指数(obstructive apnea index,AOI)>1次/小时,或阻塞性呼吸暂停低通气指数(obstructive hyponea/apnea index,AHI)>5次/小时,且最低氧饱和度<92%,诊断为OSAHS。二研究对象分组病例组:诊断OSAHS的患儿按照鼻咽镜腺样体大小及相关病史和检查分为单纯腺样体Ⅲ组(组2,35例);单纯腺样体Ⅳ组(组3,20例);腺样体肥大合并有过敏性鼻炎(组4,32例);腺样体肥大合并分泌性中耳炎组(组5,37例),腺样体肥大合并过敏性鼻炎及分泌性中耳炎(组6,31例)。对照组:(组1,22例)。选择同一时期入院诊断为“慢性扁桃体炎”的患儿作为对照组,排除过敏性鼻炎,PSG检查排除OSAHS,鼻咽镜检查诊断腺样体Ⅰ-Ⅱ度,对照组为腺样体Ⅰ-Ⅱ度组。所有儿童入院进行扁桃体切除术,经知情同意术中同时切除腺样体组织。所有入组病例均取外周血及腺样体组织进行检测,本研究经过通过医院伦理会同意及患儿监护人知情同意。三研究方法采用流式细胞仪测定入组病例外周血及腺样体组织中Th17、Treg含量,ELISA法测定其IL-17、IL-10、TGF-β的含量,RT-PCR测定RORγt、Foxp3含量。四分析方法统计学处理各组数据经检验符合正态分布,所有数据用平均值±标准差表示,各组两两间比较,RORγt,Foxp3的含量,Th17/Treg比值,IL-17、IL-10、TGF-β水平比较采用独立样本t检验,三组间比较用方差分析,所有统计学数据均由SPSS 17.0软件完成,组间统计学差异用P<0.05判断。研究结果1.儿童肥大腺样体局部及外周血中Treg比例降低,其表达FoxP3含量减少,其作用效应因子IL-10、TGF-β含量减低;腺样体局部及外周血中表现出Th17升高,其效应因子IL-17升高,其表达RORγt升高。Th17/Treg比值升高(p<0.05)。且Th17/Treg比值的偏移跟单纯腺样体大小有相关性。2.腺样体肥大合并过敏性鼻炎的儿童OSAHS中同样存在Th17/Treg比值升高,跟不合并过敏性鼻炎的儿童OSAHS相比,比值偏移更明显。3.Th17/Treg比值在腺样体肥大合并分泌性中耳炎患儿外周血及腺样体局部均有升高,比单纯腺样体肥大患儿中的比值有所下降。4.腺样体肥大合并过敏性鼻炎及分泌性中耳炎中Th17/Treg比值偏移跟单纯腺样体肥大比无明显差异,但高于腺样体肥大合并中耳炎中的比值的偏移。研究结论Th17/Treg比值升高跟儿童OSAHS发病有关,Th17/Treg比值偏移程度与腺样体大小相关。合并过敏性鼻炎比值偏移更明显,合并分泌性中耳炎时比值偏移有所减轻。腺样体肥大合并过敏性鼻炎及分泌中耳炎时Th17/Treg比值升高,比腺样体肥大合并分泌性中耳炎偏移更明显。调节性T细胞与Th17在儿童腺样体肥大发病及其并发症发病中有重要作用。过敏性鼻炎,分泌性中耳炎,腺样体肥大三者可能通过Treg细胞实现整体的免疫调节。