肺癌是影响人类健康的一大全球性疾病,其发病率和死亡率都为所有癌症之首。在我国肺癌的发病率和死亡率逐年递增,中国已成为世界上罹患肺癌人口最多的国家。肺癌对化学药物敏感但是极易发生耐受,在临床上急需开发全新的肺癌治疗药物以应对当前日益严峻的现状。肺癌的发生发展与烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)密切相关。目前已发现有多种针对nAChR的高效特异性拮抗剂,例如α-芋螺毒素的短肽拮抗剂能够高亲和力和特异性地针对各种nAChRs亚型。本研究旨在鉴定nAChR各亚基在肺癌细胞中的表达差异性,并针对该差异性寻找恰当的nAChR特异性阻断剂,为肺癌的治疗提供新对策。本实验研究了 α3、α4、α5、α6、α7、α9、α10、β2、β3 和 β4 nAChR 亚基在四株肺癌细胞A549、NCI-H1 299、NCI-H1688、DMS114和一株正常人胚肺层纤维细胞HEL中的表达情况。使用PCR试验、实时荧光定量PCR试验和Western Blot试验分别检测了肺癌细胞中各nAChR亚基在mRNA水平上的表达情况以及在蛋白水平上的差异性表达情况。结果显示与正常组细胞HEL相比,α3和β4 nAChR亚基在A549和NCI-H1299中表现出显著性高表达;α4、α9和β2 nAChR亚基在NCI-H1688中表现出显著性高表达;在DMS114细胞中α3和α4 nAChR亚基也处于高表达水平。先前的研究结果表明海南产α-芋螺毒素TxID是α3β4 nAChR的有效拮抗剂,其IC50仅为12.5 nM,具有潜在的肺癌治疗作用。使用经典MTT比色法探究α-芋螺毒素TxID与临床广谱化疗药物盐酸阿霉素联用在肺癌细胞中的作用,研究两者单独使用和联合使用时细胞毒性的差异。结果显示α-芋螺毒素TxID对肺癌细胞和正常细胞都有细胞毒性作用,且对癌细胞的细胞毒性更大。同时与单独使用药物相比,α-芋螺毒素TxID与盐酸阿霉素联合给药对各肺癌细胞的细胞毒性更强。本研究确定了不同nAChR亚基在多种肺癌细胞系中的差异表达及TxID在各肺癌细胞系中的细胞毒性,为今后α-芋螺毒素TxID参与肺癌治疗奠定了坚实的理论基础,并为芋螺毒素的抗癌研究提供了新思路。