60Coγ射线对大鼠涎腺上皮细胞Rad50表达及超微结构的影响

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目的:检测Rad50(Radiation sensitive50)在放射后大鼠涎腺上皮细胞的表达水平及涎腺上皮放射后的超微结构,探讨Rad50在大鼠涎腺上皮细胞放射性损伤修复过程中的作用和意义。方法:选用36只Wistar大鼠,随机分为6组:对照组(未照射)、3Gy组、6Gy组、9Gy组、12Gy组、15Gy组,每组6只。用60Co γ射线一次性放射大鼠腮腺、颌下腺,放射2小时后处死,立即取出大鼠腮腺、颌下腺组织备用。采用透射电镜观察放射后各组涎腺细胞超微结构的变化;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Rad50基因表达水平的变化;运用免疫组织化学法观察其蛋白表达水平的变化。结果:半定量RT-PCR结果显示,在对照组和放射组中Rad50均有表达;Rad50mRNA在各放射组和对照组中的表达没有统计学差异(P>0.05);Rad50蛋白在大鼠腮腺中主要表达于导管系统和浆液性腺泡,在颌下腺浆液性腺泡中也有表达,在导管和粘液性腺泡中弱表达。大鼠浆液性腺泡中15Gy组与对照组相比表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),其余各放射组与对照组Rad50表达无显著差异(P>0.05)。透射电镜下可见:大鼠腮腺、颌下腺各种细胞超微结构随着放射剂量的增加,可发生较明显改变。结论:高剂量放射2小时后大鼠腮腺、颌下腺细胞超微结构发生明显改变,小剂量放射对涎腺Rad50mRNA和蛋白表达并没有明显影响,但是高剂量组中放射可引起腮腺组织浆液性腺泡Rad50蛋白表达下降,提示Rad50在涎腺放射损伤修复中的表达水平有限,这可能是涎腺放射敏感性机制之一。
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