氧化应激在脑缺血再灌注(CIR)损伤过程中发挥重要作用,故具有强抗氧化活性的中药黄酮类成分在治疗CIR等脑血管疾病方面具有良好的疗效。本实验采用系统药理学的研究方法从山楂叶中筛选出活性黄酮分子山柰酚(KA),并预测出其对抗CIR损伤的机制,建立整体动物模型研究KA对脑中动脉栓塞大鼠的CIR损伤的保护作用,采用Real Time-PCR法检测脑组织中抗氧化通路因子核因子E2相关因子2(Nrf 2)mRNA和人血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达情况,采用Western blotting法测定Nrf 2和HO-1蛋白表达情况,对KA对抗CIR损伤的机制进行探讨。1.经中药系统药理学数据库(TCMSP)预测分析得出KA为山楂叶主要的活性成分之一,经比较基因组数据库(CTD)检测发现其作用靶点与再灌注、动脉粥样硬化和脑缺血等疾病密切相连,具有多途径的作用机制,其中Nrf2/HO-1通路是对抗CIR的关键机制之一。2.线栓法建立大鼠CIR模型,预防性给予KA,与模型组相比KA组及山楂叶总黄酮组CIR大鼠死亡率下降,神经功能评分明显降低,脑梗死体积减小,抗氧化因子SOD含量明显上升,过氧化反应产物MDA含量下降,且预防性给予KA时间越长,效果最好,提示KA对抗大鼠CIR损伤的作用可能与抗氧化途径有关。3.结合系统药理学分析结果,探讨了 KA发挥脑保护作用的抗氧化机制,结果表明相对于模型组,预防性给予KA可显著升高脑组织中Nrf 2 mRNA、HO-1 mRNA含量,效果优于其他对照药物;Western blotting结果显示KA及山楂叶总黄酮均可促进CIR大鼠脑组织中Nrf2蛋白由细胞质转移到细胞核中,并激活下游HO-1蛋白,使其含量明显增多,从而发挥抗氧化作用。系统药理学为中药研究中活性成分的筛选提供了一种新的思路。通过系统药理学研究从山楂叶总黄酮中筛选出可能具有抗CIR损伤活性成分KA,作用机制可能与抗氧化作用密切相关,动物实验证明KA是山楂叶总黄酮对抗CIR的核心成分,Nrf2/HO-1是其抗氧化作用机制之一,预防性给予山奈酚的用药时间与抗损伤效果正相关。