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目的:比较不同冷冻保护剂和不同冷冻方法对睾丸组织的影响,探讨冷冻睾丸组织的最佳的保护剂和冷冻方法。 方法:本研究试验选取正常健康睾丸组织,随机分为五组:正常对照组(Ⅰ组)。以甘油做冷冻保护剂,用液氮悬吊法冷冻保存(Ⅱ组);以甘油做保护剂,用程序降温法冷冻保存(Ⅲ组);以二甲基亚砜做保护剂,用液氮悬吊法冷冻保存(Ⅳ组);以二甲基亚砜做保护剂,用程序降温法冷冻保存(Ⅴ组)。冷冻复苏后通过实体显微镜观察活动精子数量,普通HE病理切片,电镜综合分析不同保护剂和冷冻方法对睾丸组织的影响。 结果:1.实体显微镜下,各组睾丸曲精小管结构无明显变化。2.各组睾丸组织中均发现活动精子。3.普通HE病理切片显示Ⅱ组组织损伤最大,Ⅴ组组织损伤最小,Ⅲ组,Ⅳ组介于两者之间。4.透射电镜结果提示同普通HE病理切片。 结论.1.二甲基亚砜作为组织冷冻保护剂,保护效果优于甘油。 2.程序降温法较液氮悬吊法对组织损伤为轻。 第二部分:不同冷冻保护剂和冷冻方法冷冻精子的效果分析 目的:本研究比较不同冷冻保护剂和不同冷冻方法对精子的影响,探讨冷冻精子的最佳的保护剂和冷冻方法。 方法:本研究试验选取正常健康精液,随机分为五组:正常对照组(Ⅰ组);以甘油做冷冻保护剂,用液氮悬吊法冷冻保存(Ⅱ组);以甘油做保护剂,用程序降温法冷冻保存(Ⅲ组);以二甲基亚砜做保护剂,用液氮悬吊法冷冻保存(Ⅳ组);以二甲基亚砜做保护剂,用程序