以市售大豆异黄酮粉为底物,采用从素食者粪便中分离得到的肠道菌LG-Q2.即鹑鸡肠球菌(Enterococcus.gallinarum)为工作菌,对发酵代谢产物雌马酚进行制备与生物活性评价。采用单因素试验、正交试验、响应曲面法,在前期工作的基础上,进一步考查了工作菌的生长曲线、不同碳源对雌马酚转化力的影响,并优化促进雌马酚转化力的发酵条件。结果表明:生长规律为37℃厌氧条件下,培养6 h后进入指数期、24 h后进入生长平稳期、39 h后为衰亡期,活菌数为1.34× 108;葡萄糖为最适碳源,雌马酚转化能力最高为2.21μg/mg;最优发酵条件:发酵液中葡萄糖浓度为5.00g/L,pH值7.02,NaCl浓度3.93g/L时,雌马酚转化力最大预测值2.59μg/mg,验证试验实际测得的雌马酚转化能力为2.58μg/mg,二者差异不显著,证明响应模型成立,试验得到的最优条件结果可靠。向培养基中分别加入不同梯度浓度的葡萄糖、麦芽糖、乳糖、木聚糖和蔗糖等不同碳源,确定最佳碳源种类,结果显示,当加入葡萄糖雌马酚转化力最高。以碳源、pH值和NaCl为单因素、雌马酚转化力为评价指标,通过响应曲面试验考察不同因素对肠道菌LG-Q2产雌马酚能力的影响,确定肠道菌LG-Q2代谢大豆异黄酮的最佳条件。结果是响应曲面试验中当最佳条件为葡萄糖浓度5.00g/L,pH值7,NaCl 浓度 3.93g/L。以发酵液为样品,选用活性炭脱色、聚酰胺树脂为吸附剂进行纯化处理,经冷冻干燥制备雌马酚。采用单因素正交试验考察脱色时间、活性炭用量以及脱色温度对脱色率的影响;优化最佳脱色、纯化条件,结果表明:对脱色率影响最大的因素为脱色时间,其次为脱色温度、脱色剂量;当脱色温度50℃,脱色剂量2g,脱色的时间1.5h为最佳条件。之后对脱色后的样液进行雌马酚纯化,以(乙腈+甲醇+水):(3+4+3)洗脱剂用量、洗脱速率、聚酰胺树脂吸附剂用量为单因素,雌马酚含量为评价指标,经正交试验优化纯化条件,结果表明:洗脱剂用量对雌马酚浓度影响结果最大,其次为吸附剂量和洗脱速率;洗脱剂用量40mL,洗脱速率0.6mL/min,吸附剂用量2g。采用优化的条件参数及液相色谱法,发酵液雌马酚转化率为0.25%,相同方法做回收试验,回收率为78.38%,样品纯度为38%。灌胃方式对试验小鼠分别喂入,以雌马酚样品、雌马酚标品、大豆异黄酮保健品为受试物,设计不同试验组,径口灌胃给雌雄小鼠,试验45天,每隔15天对小鼠眼眶处进行取血后离心得血清,用试剂盒法测定小鼠血清中游离脂肪酸、高、低密度脂蛋白胆固醇、总蛋白质定量、总胆固醇和甘油三酯的浓度,考察雌马酚样品对小鼠体酯的影响,评价其生物活性。结果表明:雌马酚标品、雌马酚样品、大豆异黄酮均会对小鼠体酯产生不同程度的影响,雌马酚标品的作用效果最大,其次为雌马酚样品、大豆异黄酮。在试验结束后对试验雄鼠进行颈椎脱臼处死,取体内睾丸组织进行HE染色,显微镜下观察睾丸组织病理切片,将试验组与对照组的切片结果进行比对分析法,结构表明雌马酚样品对试验雄鼠睾丸组织无明显影响。