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第一部分:人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞胰岛素受体底物的表达目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)的表达.结论:由骨组织分离和培养的细胞具有正常人成骨细胞的形态和功能特征.人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞均可表达IRS mRNA.且IRS不同成员在同一细胞中的表达丰度不同.第二部分:17β-雌二醇和孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-1、IRS-2的影响目的:观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-1、IRS-2的影响,探讨17β-雌二醇和孕酮对成骨细胞的作用.结论:17β-雌二醇和孕酮均可使MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-2 mRNA的表达上调,它们在上调MG-63细胞和正常人成骨细胞的IRS-2 mRNA表达中具有正性协同效应.17β-雌二醇和孕酮可影响MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-2mRNA的表达,但不影响IRS-1mRNA的表达.其中孕酮对IRS-2 mRNA表达的影响发生在第一时相的快速反应期,而17β-雌二醇对IRS-2mRNA表达的影响既可发生在第一时相的快速反应期(干预后12h),也可出现在第二时相的延迟反应期(干预后24h),说明不同的IRS家族成员对同一细胞具有效应的多样性.雌、孕激素可能参与了IRS信号通路的调节.第三部分:17β-雌二醇和孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞I RS-1、-2蛋白表达及磷酸化的影响目的:观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-1、IRS-2蛋白表达及磷酸化的影响,进一步探讨17β-雌二醇和孕酮对成骨细胞的作用.结论:17β-雌二醇和孕酮能够在翻译水平上调人成骨肉瘤MG-63细胞和正常人成骨细胞IRS-2蛋白的表达,并促使IRS-2的磷酸化,两种细胞之间存在正性协同效应.虽然二者在翻译水平对IRS-1的表达无影响,但可促使IRS-1蛋白的去磷酸化.