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目的：研究人类剪切修复基因XPD（Xeroderma pigmentosum D)转染至人HepG2肝癌细胞后Rb(Retinoblastoma gene,视网膜母细胞瘤基因)和MAD2（Mitoticarrest deficient2,有丝分裂阻滞缺陷蛋白2）基因表达的变化及对HepG2肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法：1、培养人HepG2肝癌细胞，细胞生长稳定后,传代并接种于6cm培养皿中继续培养。2、将我实验室构建与合成的pEGFP-N2-XPD重组质粒和pEGFP-N2空载质粒，应用Lipofectamine2000将前两者瞬时转染至人HepG2肝癌细胞中。实验分为4组，分别是无转染的HepG2肝癌细胞空白对照组（空白对照组）脂质体转染HepG2肝癌细胞组（脂质体组）空载质粒转染细胞HepG2-pEGFP-N2组（N2组）重组质粒转染细胞HepG2-pEGFP-N2-XPD组（XPD组）3、转染后，提取各组RNA，用RT-PCR检测各组细胞的XPD、Rb及MAD2的mRNA表达量4、转染后提取各组的总蛋白，通过Western blotting法检测各组细胞中XPD、Rb及MAD2蛋白质的表达量。5、将细胞接种于96孔板，进行转染后，通过MTT检测各组细胞的增值活力。6、用流式细胞仪检测各组的细胞凋亡情况及细胞周期。结果：1、转染至人HepG2细胞24h后，在荧光显微镜下观察，发现XPD组和N2组细胞中都有绿色荧光蛋白的表达，绿色荧光覆盖率75%以上，而未转染的HepG2细胞不表达绿色荧光。2、RT-PCR检测各组各基因mRNA表达量，较其他3组，XPD组中XPD和Rb的表达量明显升高（P <0.05），而MAD2的表达量明显下降（P <0.05）。3、Western blotting检测各组各基因蛋白的表达量，较其他3组，XPD组中XPD和Rb的表达量明显升高（P <0.05），而MAD2的表达量明显下降（P <0.05）。4、MTT结果显示，XPD组的HepG2肝癌细胞增值活力明显降低。5、流式细胞仪检测凋亡结果显示，XPD组细胞凋亡率明显升高（P <0.05）6、流式细胞仪检测各组细胞周期结果显示，XPD组的G1期细胞数明显多于其他三组，S期细胞数较其他三组明显减少，差异有统计学意义（均P<0.05），空白对照组、脂质体组及N2组细胞之间G1期和S期差异无统计学意义（均P>0.05），说明XPD组的细胞停滞在G1期，难以进入S期。结论：XPD基因能抑制MAD2基因的表达，促进Rb基因的表达，XPD能抑制肝癌细胞的增殖，促进肝癌细胞的凋亡。