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植物内生菌是能够生活在健康植物的组织和器官并且不引起明显症状的微生物,植物内生菌种类丰富,分布广泛,具有良好的生物活性和应用潜力,是微生物系统中重要的组成部分。本文以海带内生菌DNN6为研究对象,对其进行培养条件的优化,并且对菌株DNN6代谢产物巾的蛋白质与多糖进行分离纯化和分析,选择抑菌活性最好的蛋白组分和多糖组分对小黄鱼进行保鲜研究。研究结果如下：1.采用单因素及正交实验,对菌株DNN6进行培养优化,获得最佳的培养条件为：氯化钠5e/L、蔗糖50g/L、磷酸二氢铵0.2g/L、硫酸镁0.2g/L和磷酸氢二钾1g/L,培养温度是40℃,培养时间为2d。在优化培养条件下培养的菌株DNN6对指示菌抑菌圈的直径,比在初始培养条件下培养的菌株DNN6对指示菌抑菌圈的直径平均长2mm,菌株DNN6上清液对指示菌的抑菌圈直径,比菌体对指示菌的抑菌圈直径平均长2mm。2.用饱和度是85%的硫酸铵分离出菌株DNN6代谢产物中的蛋白质。菌株DNN6的蛋白纯化条件：采用DEAE-52离子交换层析柱,0.05mol/L Tris-HCl缓冲液的pH值为8.7,洗脱盐溶液的浓度为0.75mol/L,分离得到4种蛋白组分,其中蛋白组分F4抑菌活性最好。当其浓度为1000μg/mL时,对超氧阴离子自由基的清除率是75.68%,对羟基自由基的清除率是24.8%。通过SDS-PAGE电泳实验对蛋白组分F4进行纯度检测,结果显示蛋白组分F4共有分子量约为170、55、41、39、37、34、20、14、8kDa9条带,利用MALDI-TOF/TOF MS质谱对分子量是10kDa以下的蛋白质进行检测,得出其精确分子量为8770.6Da。3.用醇沉法分离出菌株DNN6代谢产物中的多糖,所用无水乙醇的体积是菌株DNN6上清液体积的2.5倍。菌株DNN6的多糖纯化条件：采用SephadexG-100凝胶柱,用双蒸水洗脱,多糖经过层析柱分离出2种组分EPS1、EPS2,其中EPS1抑菌活性最好。EPS1浓度为250μg/mL时,对超氧阴离子自由基的清除率是76.15%,EPS1浓度为125μg/mL时,对羟基自由基的清除率是23%。对EPS1进行结构鉴定和分析,从气相色谱实验结果可知EPS1单糖的成分只有葡萄糖。从红外光谱分析结果可知,其特征吸收峰代表的官能团有-OH、-C≡C-、-C=C-等。4.利用蛋白组分F4和多糖组分EPS1对小黄鱼进行保鲜,实验结果显示：蛋白组分F4的浓度为800g/mL时,对在小黄鱼的保鲜效果最佳,贮藏期为4d,在贮藏到第4d时,小黄鱼依然保持良好的气味,肌肉富有弹性,眼睛轻微凹陷,体表有光泽且肌肉纹理紧密,鱼鳞轻微脱落,细菌总数为4.961gcfu/g,pH值为7.03,TVB-N值为12.7mg/100g,TBA值为0.89mg/kg,符合国家鱼的二级品标准。多糖组分EPS1浓度为100μg/mL时,对小黄鱼的保鲜效果最佳,贮藏期为4d,在贮藏到第4d时,鱼体表面有光泽,肌肉组织紧密,有弹性,气味清新,眼睛几乎水平,鱼鳞不易脱落。细菌总数为4.98lgcfu/g,pH值为7.0,TVB-N的值为12.9mg/100g, TBA值为0.87mg/kg,符合国家鱼的二级品标准。